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芋茎尖脱毒和快繁体系的初步研究

唐东梅  
【摘要】:本文以浙江红梗芋和崇明香酥芋为试验材料,进行了茎尖分生组织培养脱病毒以及茎尖快速繁殖的研究。选择0.3~0.5mm的茎尖,以MS为基本培养基,研究了不同的外植体消毒方式、不同培养基配方、不同基因型芋、不同茎尖大小0.3~0.9mm、不同光照、5~10g/L活性炭等培养条件对芋茎尖诱导分化的影响;应用RNA探针检测和电镜方法进行DMV病毒检测、研究了二次茎尖脱毒培养对芋茎尖脱毒的影响;研究了培养基中添加0.05~0.15mg/LTDZ、5~20mg/L Ade、0.5~5mg/L 6-BA、0.1~2 mg/L NAA以及液体培养的培养方式对芋茎尖诱导分化及增殖的影响。结果表明:外植体最佳消毒方式为70%酒精30s+饱和漂白粉20min,未污染率94%转绿率84%;最佳诱导分化的培养基MS+2mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA;浙江红梗芋的转绿率比崇明香酥芋的高36.64%;茎尖大小0.3mm的成苗率低,茎尖大小0.5mm成苗率52.86%,茎尖大小0.9mm成苗率85%;光照培养比暗培养有利于芋茎尖分化;添加5.0g/L活性炭,芋组培苗的转绿率、转绿天数的效果最佳。二次培养提高分化率10%并提高脱毒率;在培养基中添加2.0mg/L 6-BA和0.5mg/LNAA,促进芽增殖,增殖系数最高为2.85;添加0.1mg/LTDZ上的转绿率和分化率最高为96.6%、56.7%,转绿时间最短为8~9天;当添加5 mg/L Ade时,芋组培苗的分化率为43.3%,转绿率达100%,转绿时间为7天,效果最好;液体培养在茎尖分化率、增殖方面占优势,且生长健壮,茎粗,根系发育旺盛。


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