酶抑制法农药残留快速检测技术研究

【摘要】：农药残留检测,是农产品质量安全控制的关键手段,而对于蔬菜等鲜活农产品中农药残留的快速检测,更是相当一段时期控制质量安全的重要内容,本研究比较测定了小白鼠肝脏和蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶对21种氨基甲酸酯和有机磷类杀虫剂的检测灵敏度,选择原料易于标准化批量饲养、酶活力高、对多种氨基甲酸酯和有机磷类农药检测灵敏度高的蜜蜂头部胆碱酯酶作为酶原,建立了蔬菜中氨基甲酸酯和有机磷类农药残留快速检测方法。并从酶、显色剂和底物用量以及反应时间等多种影响快速检测灵敏度的因素进行研究,确立优化的检测条件。该方法对克百威、西维因、丁硫克百威、仲丁威、敌敌畏、灭多威、叶蝉散、喹硫磷等多种农药的检测灵敏度非常高,抑制中浓度均低于0.1mg/L。在此基础上,通过标准化酶原制备方法、酶质量控制方法、试剂盒参数优化、配套样品前处理技术、试剂盒质量控制技术标准,制备了基于蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶为酶原的农药残留快速检测试剂盒,初步应用于市场蔬菜样品检测,检测结果与仪器测定结果基本相符。