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进境木质包装材料中伞滑刃属线虫的种类鉴定

林何燕  
【摘要】:松材线虫病是林业上的一种毁灭性病害,给我国的林业和自然环境造成了严重的危害。植物检疫是防止该病发展的重要措施。在进境木质包装检疫中,除该病的病原物松材线虫 [Bursaphelenchus xylophilus (stciner et buhrer)Nickel]外,还常常截获同属于伞滑刃线虫属(Bursaphelenchus spp.)的多种与之形态非常相似的线虫。本研究以进境木质包装检疫中截获的伞滑刃属线虫为研究材料进行了以下研究: 从进境木质包装材料申截获八种伞滑刃属线虫,分别进行了形态描述和鉴定。其中松材线虫、拟松材线虫(B.mucronatus)在进境植物检疫中较为常见,B.rainulfi、B.conicaudatus为近年(2002,2000)报道的新种,B.doui、B.singaporiensis、B.ar…为尚未正式发表的新种(来自Dr.Helen Braasch的个人研究通讯),另有一种(wx5)尚未完成鉴定。国內尚未见上述五种线虫的报道。本研究将与松材线虫形态相似的 B.doui、B.singaporiensis和B.conicaudatue与松材线虫作了比较。 选取尚未完成鉴定的伞滑刃线虫wx5(疑为B.corneolus)分离物,以松材线虫和拟松材线虫为对照,做ITS-RFLP分析。ITS通用引物的扩增结果表明松材线虫和拟松材线虫ITS区扩增产物都约为940 bp,而用ITS引物扩增分离物wx5则得到长约为1150 bp的片段,表明以ITS-PCR可将该线虫与其他两种线虫区分开,但不能区分松材线虫和拟松材线虫。利用4种限制性内切酶对松材线虫和wx5的ITS扩增产物进行酶切分析,结果表明Alu I、Msp I、Hinf、I HaeⅢ四种限制性内切酶对松材线虫和wx5扩增产物的酶切结果均有明显差异。用松材线虫的特异性引物对松材线虫、拟松材线虫和wx5进行ITS-PCR分析,只有松材线虫扩增出长约580 bp的片段,而拟松材线虫和wx5均未扩增出条带。


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