收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

双孢蘑菇培养料二次发酵过程中的细菌群落结构研究

何丽鸿  
【摘要】:“后发酵”是双孢蘑菇(Agaricus bisporus)培养料制备工艺中的关键技术,通过室内控温的堆肥过程,可以进一步促进培养料成为有利于蘑菇菌丝吸收、利用的“选择性”栽培基质。在这一过程中,各种嗜热微生物的生理代谢和群落衍替发挥了至关重要的作用,本试验运用PCR-DGGE(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis,变性梯度凝胶电泳)和ARDRA(Amplified Ribosomal DNA Restriction Analysis,核糖体DNA的限制性片段长度多态性分析)分析相结合的现代分子生态学方法,对“后发酵”期间双孢蘑菇培养料内的细菌群落结构进行了初步的研究: 1.对于高有机含量的培养料样品,微生物总DNA的提取采用了较为温和的细胞裂解法(化学破壁结合生物酶解),高盐浓度(1.1M NaCl)的细胞裂解液中加入PVPP,结合PEG-8000进行DNA沉淀,能有效地减少腐殖酸等杂质的污染,提取的DNA可直接用于限制性酶切和PCR扩增。 2.对取自“后发酵”不同时期的七份培养料样品,特异性扩增细菌16S rDNA的V3可变区,用于DGGE分离。V3-DGGE图谱显示整个“后发酵”过程中细菌的群落结构发生了明显的变化,且与“后发酵”的生产工艺相对应,细菌的衍替情况可大致分为四个时期,分别以C1、C3、C6和C7样品为代表。针对该四份样品,建立细菌16SrDNA全长文库,ARDRA分析的结果同DGGE一致,以上四个文库的16SrDNA组成均以各自独有的酶切类型为主。DGGE和ARDRA方法相互验证说明利用现代分子生态学的方法能快速、准确地对培养料发酵过程中的微生物群落结构进行动态的检测。 3.对DGGE图谱中的主要条带和ARDRA文库中的优势类群进行序列测定,序列分析的结果均显示:培养料中的细菌组成要远远丰富于人们用传统的分离方法所获得的类群,“空气调节”时期的培养料中不仅检测到了前人用经典培养方法获得的Bacillus属嗜热细菌,还发现了一些未曾报道的Bacilli门的成员,如Trichococcus属、Planococcus属和Caryophanon属,以及γ-Proteobacteria亚纲。而在“后发酵”刚开始和即将结束的培养料中分别检测到了Thermus thermophilus和α-Proteobacteria亚纲的细菌,这些是近年来利用分子生物学方法在各类高温堆肥中发现的新类群;更为重要的是在整个“后发酵”过程中还发现了大量目前尚未获得培养的细菌类群。可见,DGGE和ARDRA方法的应用不仅可以对传统的研究结果进行验证,更为重要的是极大地拓宽和加深了人们对堆肥这一复杂生境中的微生物的认识。 对双孢蘑菇培养料中的微生物区系进行研究有助于人们更深入地了解堆肥发生的机理,从而更好地实现对其工艺的控制和优化;本试验是分子生态学方法在该研究领域的一次尝试,结果显示PCR-DGGE的应用能直观、灵敏地反映整个“后发酵”过程中的微生物衍替情况,若能将DGGE电泳图谱与其所代表的微生物类群及其功能结合起来,考察DGGE图谱和发酵料质量好坏的相关性,就有可能为培养料的质量控制提供崭新的思路,即建立分子指标。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前19条
1 彭宇鸿;夏白雪;杨阳;聂远洋;徐培伦;王瑞丰;田伏洲;孙群;;利用PCR-DGGE分析胆固醇结石和胆汁中细菌群落结构[J];四川大学学报(自然科学版);2016年03期
2 高亦豹;王海燕;徐岩;;利用PCR-DGGE未培养技术对中国白酒高温和中温大曲细菌群落结构的分析[J];微生物学通报;2010年07期
3 何丽鸿;陈明杰;潘迎捷;;采用变性梯度凝胶电泳研究双孢蘑菇培养料后发酵过程中的细菌群落结构[J];微生物学报;2009年02期
4 夏耘;郁二蒙;谢骏;余德光;王广军;李志斐;王海英;龚望宝;;基于PCR-DGGE技术分析生物絮团的细菌群落结构[J];水产学报;2012年10期
5 倪加加;余育和;胡合华;;钉螺体内细菌群落结构PCR-DGGE分析方法的建立[J];四川动物;2010年05期
6 吕新;刘兰英;陈丽华;李玥仁;林碧娇;;应用PCR-DGGE技术分析福州左海湖的细菌群落组成[J];福建农业学报;2016年09期
7 萨如拉;高聚林;青格尔;于晓芳;闹干朝鲁;赵吉睿;;玉米秸秆深翻还田土壤细菌群落16SrDNA-PCR-DGGE分析[J];玉米科学;2014年03期
8 徐松萍;;双孢蘑菇二次发酵效益高[J];云南农业;2007年09期
9 刘敏;朱开玲;李洪波;张涛;肖天;;应用PCR-DGGE技术分析黄海冷水团海域的细菌群落组成[J];环境科学;2008年04期
10 孟镇;熊正河;钟其顶;白志辉;;应用PCR-DGGE技术解析白酒大曲细菌群落结构[J];食品与发酵工业;2010年10期
11 嵇辛勤;李世静;陈佳琪;雷云;陈强;;应用PCR-DGGE技术分析鸭场水样样本中细菌群落结构[J];黑龙江畜牧兽医;2016年05期
12 余彬彬;李钧敏;金则新;;硝基苯废水驯化过程中细菌群落结构的变化[J];浙江大学学报(理学版);2010年01期
13 李金金;倪加加;李学梅;颜庆云;余育和;;南方大口鲇消化道细菌群落结构与其胃肠分化的关系[J];水生生物学报;2013年04期
14 曾广宇;周国英;;双孢蘑菇堆肥发酵研究现状[J];北方园艺;2007年12期
15 伊丽娜;马原栋;崔庆锋;俞理;郑文涛;;分子生态学方法对油藏细菌群落结构分析的比较[J];科学技术与工程;2014年21期
16 蔡林林;周巧红;王川;李柱;成水平;吴振斌;;南淝河细菌群落结构的研究[J];环境科学与技术;2012年03期
17 金笑;寇文伯;于昊天;刘亚军;马燕天;吴兰;;鄱阳湖不同区域沉积物细菌群落结构、功能变化及其与环境因子的关系[J];环境科学研究;2017年04期
18 王鹏;陈波;李传琼;李燕;;赣江南昌段丰水期细菌群落特征[J];中国环境科学;2016年08期
19 杨尚东;李荣坦;吴俊;郭伊娟;龙明华;;番茄连作与轮作土壤生物学特性及细菌群落结构的比较[J];生态环境学报;2016年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 何丽鸿;于荣利;陈明杰;汪虹;冯爱萍;潘迎捷;;双孢蘑菇培养料后发酵过程中的细菌群落结构研究[A];第九届全国食用菌学术研讨会摘要集[C];2010年
2 张举龙;张国庆;陈青君;;点柄乳牛肝菌菌塘细菌群落结构[A];中国菌物学会第六届会员代表大会(2014年学术年会)暨贵州省食用菌产业发展高峰论坛会议摘要[C];2014年
3 宋铁英;Lotta Martensson;包晓东;郑伟文;Ulla Rasmussen;;稻田中蓝细菌群落的多态性[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2003年学术交流会论文摘要集[C];2003年
4 王艾花;何孟常;;锑对土壤微生物活性及细菌群落结构的影响研究[A];中国土壤学会土壤环境专业委员会第十九次会议暨“农田土壤污染与修复研讨会”第二届山东省土壤污染防控与修复技术研讨会摘要集[C];2017年
5 熊金波;孙怀博;彭飞;林先贵;薛娴;褚海燕;;青藏高原短期增温实验引起土壤细菌群落的快速响应[A];面向未来的土壤科学(中册)——中国土壤学会第十二次全国会员代表大会暨第九届海峡两岸土壤肥料学术交流研讨会论文集[C];2012年
6 龙珍满;罗丛强;杨品红;邓琼;;鱼类对水体细菌群落结构的影响及其影响机制探讨[A];2016年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2016年
7 何世颖;杨林章;;两种氧化铁纳米材料对土壤细菌群落影响的研究[A];农业环境与生态安全——第五届全国农业环境科学学术研讨会论文集[C];2013年
8 王英;滕齐辉;曹慧;胡锋;崔中利;;淹水和旱作水稻土中细菌群落多样性的空间分布[A];第四次全国土壤生物和生物化学学术研讨会论文集[C];2007年
9 曾军;褚海燕;林先贵;;内蒙古典型草地土壤细菌对大气氮沉降增加的响应[A];面向未来的土壤科学(中册)——中国土壤学会第十二次全国会员代表大会暨第九届海峡两岸土壤肥料学术交流研讨会论文集[C];2012年
10 陈亮;李会娜;杨民和;万方浩;;利用PCR-DGGE技术分析入侵植物薇甘菊和三叶鬼针草根际土壤细菌群落[A];第三届全国生物入侵大会论文摘要集——“全球变化与生物入侵”[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 马大卫;南极苔原土壤细菌群落和酶活性分布特征及其影响因素[D];中国科学技术大学;2013年
2 章高森;青藏高原多年冻土区微生物多样性及其潜在应用的研究[D];兰州大学;2007年
3 布仁其其格;酸马奶传统发酵过程的宏转录组学分析及细菌群落结构动态变化研究[D];内蒙古农业大学;2014年
4 荀卫兵;长期不同施肥下旱地红壤细菌群落结构特征及驱动因子的探究[D];南京农业大学;2015年
5 王晓慧;城市污水处理厂中氨氧化菌及细菌群落结构与功能研究[D];清华大学;2010年
6 张一;基于组学的蚯蚓(Amynthas heterochaetus)自身免疫系统及肠道微生物群落协同防御机理研究[D];中国农业大学;2016年
7 王金斌;基于基因组重排技术选育优质褐色双孢蘑菇品种的研究[D];上海海洋大学;2018年
8 裴斐;双孢蘑菇冷冻干燥联合微波真空干燥传质动力学及干燥过程中风味成分变化研究[D];南京农业大学;2014年
9 骆毅;应用末端限制性片段长度多态性技术对骨科感染中细菌群落的解析[D];北京协和医学院;2010年
10 陈美元;双孢蘑菇基质降解能力退化分子机理的初步研究[D];福建农林大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 何丽鸿;双孢蘑菇培养料二次发酵过程中的细菌群落结构研究[D];南京农业大学;2005年
2 刘敏;应用PCR-DGGE技术分析长江口低氧区和黄海冷水团的细菌群落组成[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2007年
3 王瑾丰;华南地区典型水稻土中磷化氢的分布与细菌群落的关系及其影响研究[D];华南理工大学;2015年
4 江沛霖;中国东南沿海部分区域微塑料附着微生物研究[D];华东师范大学;2018年
5 刘晨宇;尾水排放对地表水及地下水细菌群落影响研究[D];哈尔滨师范大学;2018年
6 何楠;玉米秸秆自然发酵过程中细菌群落演绎及BS-DX4纤维素降解菌的研究[D];西北师范大学;2017年
7 张旺园;CO_2-EOR二氧化碳泄漏对土壤细菌群落的影响[D];中国矿业大学;2018年
8 孟俞辰;油藏细菌群落结构多样性及新种系统分类学研究[D];贵州医科大学;2018年
9 吴冬梅;长江口和东海海域细菌群落结构及其生态功能预测[D];浙江海洋大学;2018年
10 刘耀;生物炭添加对农业废物底泥混合堆肥中重金属和细菌群落影响[D];湖南大学;2017年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 刘海英;首份全球土壤细菌群落图谱绘成[N];科技日报;2018年
2 朱彤;美绘制人体细菌群落分布图[N];中国知识产权报;2009年
3 江苏省农科院蔬菜所食用菌项目组 宋金悌;蘑菇培养料二次发酵技术[N];江苏农业科技报;2009年
4 本报记者 周晓艳 整理;日光温室双孢蘑菇栽培技术[N];山西科技报;2017年
5 记者 孔越 通讯员 盛剑;技术革新带动嘉善菇农新增收入900万元[N];嘉兴日报;2017年
6 记者 叶江;我市首个双孢蘑菇规模基地喜获丰收[N];丽水日报;2012年
7 李香菊 高举;如何预防双孢蘑菇薄皮及空心[N];山西科技报;2002年
8 本报记者 傅仁斌 通讯员 张青员;双孢蘑菇生产拓新路[N];湖南科技报;2006年
9 兰天;双孢蘑菇物理保鲜法[N];湖北科技报;2003年
10 ;发展双孢蘑菇市场前景广阔[N];河南科技报;2004年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978