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甘草次酸对新生仔猪生长的影响及其机理研究

何子双  
【摘要】: 甘草为豆科植物甘草、胀果甘草或光果甘草的根及根茎,具有补脾益气、祛痰止咳、清热解毒、缓急止痛、调和药性等功效。现代药理学研究表明,甘草次酸(GA)是甘草的有效成分之一,具有抗炎、抗溃疡、抗过敏、抗病毒、保肝、抗肿瘤、免疫调节等作用。其分子结构与氢化可的松相似,通过抑制动物体内11β-羟固醇脱氢酶-2型的活性,可以减慢氢化可的松的转化,提高作用强度,因此临床上常作为后者的代用品。近年来的研究显示,糖皮质激素对新生仔猪的生长具有促进作用。如初生时应用地塞米松,仔猪的生长性能增强。氢化可的松可以促进新生仔猪小肠发育和小肠上皮细胞内源性精氨酸合成功能。由于母猪乳汁精氨酸不能满足仔猪的需要,仔猪内源性合成的精氨酸具有重要的生理意义。然而,7~21日龄仔猪体内氢化可的松浓度和内源性合成精氨酸比1~3日龄显著降低,因此呈现极限下生长。增加仔猪精氨酸营养是促进其生长性能的有效手段。 基于糖皮质激素促进新生仔猪生长发育和内源性精氨酸合成功能、甘草次酸具有肾上腺皮质激素样作用和多方面的药理活性等认识,尤其是甘草次酸对新生仔猪的生长和精氨酸营养调控的研究尚属空白,本研究观察了甘草次酸对7~21日龄哺乳仔猪和代乳料饲喂的早期断奶仔猪的生长的影响,并从仔猪内分泌、血液精氨酸浓度、血液学、血液生化、血液挥发性脂肪酸、内脏器官发育、小肠黏膜乌氨酸脱羧酶活性变化,以及体外对淋巴细胞增殖的影响等方面研究了甘草次酸的作用和机理。 试验Ⅰ甘草次酸对哺乳仔猪生长的影响通过灌服不同剂量甘草次酸筛选出较佳的剂量,以及甘草次酸与氢化可的松的比较观察了甘草次酸对哺乳仔猪生长的影响。20头7日龄杜×长×大哺乳仔猪按其体重和性别在窝内随机分为4个处理,每个处理5头。3个试验组仔猪分别灌服GA25、50、100 mg·pig~(-1),对照组灌服等体积的生理盐水。每日8:00灌服1次,连续3 d。仔猪在原窝哺乳。其余饲养管理按常规。测定仔猪7、14、21日龄体重、平均日增重和增重率。发现100 mg·pig~(-1)仔猪平均日增重、增重率最高。36头7日龄哺乳仔猪按其体重和性别在窝内随机分为3个处理,每个处理12头。氢化可的松组、GA组、对照组仔猪分别灌服氢化可的松10 mg·kg~(-1)体重、GA40 mg·kg~(-1)体重或相应体积的生理盐水。测定指标、方法同前。结果表明,GA组仔猪7~14、7~21日龄平均日增重显著高于对照组(P<0.05);14~21日龄平均日增重显著高于氢化可的松组(P<0.05)。7~21日龄增重率高于氢化可的松组(P<0.1),21日龄体重高于对照组(P<0.1)。氢化可的松组7~14、7~21日龄平均日增重比对照组有所提高(P>0.05),14~21日龄有所降低(P>0.05)。提示,7~9日龄连续3日灌服GA40 mg·kg~(-1)体重促进了7~21日龄哺乳仔猪的生长,而灌服氢化可的松10 mg·kg~(-1)体重作用不明显。 试验Ⅱ甘草次酸对早期断奶仔猪生长的影响及剂量筛选7日龄长×大仔公猪,使用仔猪代乳粉配制代乳液,预试2 d后进入正式实验。20头仔猪单笼饲养,按体重和窝别随机均分为4个处理,每个处理5头。对照组使用基础日粮;实验组代乳粉中GA添加剂量分别为100、200、400 mg·kg~(-1),连续12 d。考察仔猪第9、14、21日龄体重及试验期生长性能、腹泻率及14、21日龄血液学指标的变化以确定GA的合适添加剂量。结果表明,添加200 mg·kg~(-1)GA组14、21日龄体重和9~14、14~21、9~21日龄平均日增重、增重率和平均日采食量最高,腹泻率最低,9~14日龄料重比最低(P>0.05)。400 mg·kg~(-1) GA组14日龄白细胞总数显著高于其余各组,淋巴细胞数显著高于对照组,单核细胞数显著高于对照组和100 mg·kg~(-1)组(P<0.05)。400 mg·kg~(-1)GA组21日龄单核细胞数显著低于100 mg·kg~(-1)GA组(P<0.05);200 mg·kg~(-1)GA组21.日龄淋巴细胞百分比显著高于100 mg·kg~(-1)GA组(P<0.05)。提示,代乳粉添加GA可以影响仔猪的生长性能、腹泻率和血液学指标。GA的添加剂量以200 mg·kg~(-1)较为合适。 试验Ⅲ甘草次酸对早期断奶仔猪血浆激素、氨基酸水平和血液学指标的影响30头7日龄长×大仔公猪,代乳粉为基础日粮,适应性饲62 d后按体重和窝别随机分为对照组和GA组,每组15头。GA组代乳粉中添加GA200 mg·kg~(-1),连续12 d。测定9、14、21日龄体重及试验期的生长性能。每个处理随机挑选8头,前腔静脉采血测定血浆氨基酸浓度,6头测定血浆内分泌激素和血液学指标。结果表明,与对照组相比,GA组9~14日龄增重率、平均日采食量和精氨酸摄入量显著提高,料重比显著降低(P<0.05):9~21日龄增重率提高(P=0.05),料重比显著降低(P<0.05);21日龄血浆胰高血糖素显著降低、精氨酸显著提高(P<0.05);14和21日龄血液淋巴细胞百分比提高、中性白细胞百分比显著降低(P<0.05),14日龄平均红细胞血红蛋白浓度显著提高(P<0.05);21日龄血液平均红细胞容积显著提高,中性/淋巴细胞比值显著降低(P<0.05)。提示,代乳粉添加GA 200 mg·kg~(-1)促进了早期断奶仔猪的生长,增强了内源性精氨酸的合成和造血功能,调节了内分泌和免疫功能。 试验Ⅳ甘草次酸对仔猪外周血淋巴细胞增殖的影响取7、14、21日龄仔猪的血液淋巴细胞进行体外培养,以MTT法测定甘草次酸(GA,100 mg·L~(-1)浓度起,系列5倍稀释)对细胞增殖和ConA诱导的淋巴细胞转化的影响。结果显示,与对照组相比,100 mg·L~(-1)GA组A_(570)值显著或极显著低于其余各个浓度组和细胞对照组(P<0.05或P<0.01),低于此浓度的各个GA组A_(570)值与对照组差异不显著(P>0.05)。在7、14日龄仔猪淋巴细胞,各个浓度GA+ConA组A_(570)值均显著或极显著低于细胞对照组(P<0.05或P<0.01);而在21日龄仔猪淋巴细胞,只有100 mg·L~(-1)GA+ConA组A_(570)值显著低于细胞对照组。提示,100 mg·L~(-1) GA抑制了体外培养的仔猪淋巴细胞增值,而低于此浓度GA没有促进淋巴细胞增值;GA对ConA诱导的不同日龄仔猪淋巴细胞转化作用具有差异性。 试验Ⅴ甘草次酸对早期断奶仔猪血液生化和挥发性脂肪酸的影响12头7日龄长×大仔公猪,采用代乳粉饲养,适应2 d后随机分为对照组和GA组。GA组代乳粉中添加GA200 mg·kg~(-1),连续12 d。测定仔猪平均日采食量和粗蛋白、粗脂肪、精氨酸摄入量;14、21日龄前腔静脉采血,测定血液生化指标和挥发性脂肪酸浓度。结果显示,与对照组相比,GA组仔猪平均日采食量、粗蛋白、粗脂肪、精氨酸摄入量差异不显著(P>0.05);14日龄丙酸、异戊酸浓度显著增加,21日龄丙酸显著提高,丁酸、异戊酸显著降低(P<0.05);血液尿素氮、氨、葡萄糖、总蛋白、白蛋白、总胆固醇差异不显著(P>0.05)。提示,代乳粉添加GA 200 mg·kg~(-1)可以影响仔猪的脂肪代谢,对血液生化指标(尿素氮、氨、葡萄糖、总蛋白、白蛋白、胆固醇等)没有显著影响。 试验Ⅵ甘草次酸对早期断奶仔猪内脏器官发育的影响12头7日龄长×大仔公猪,采用代乳粉饲养,适应2 d后随机均分为对照组和GA组。GA组在代乳粉中添加GA200 mg·kg~(-1),连续12 d。21日龄仔猪称重后处死,测定内脏器官质量和指数(内脏质量/体重)。取小肠黏膜测定蛋白质含量;空肠上皮细胞测定鸟氨酸脱羧酶活性;空肠、回肠制作石蜡切片,苏木素-伊红染色,测定黏膜绒毛高度、隐窝深度和固有层厚度。结果显示,与对照组相比,GA组肝脏指数和小肠质量/长度比显著增加(P<0.05),空肠、回肠的绒毛高度和回肠隐窝深度显著增加(P<0.05),空肠上皮细胞鸟氨酸脱羧酶活性显著增强(P<0.05)。小肠黏膜蛋白质含量差异不显著(P>0.05)。提示,代乳粉添加GA200 mg·kg~(-1)促进了仔猪肝脏和小肠的发育;增加了仔猪空肠和回肠绒毛高度和回肠隐窝深度,提高了空肠上皮细胞鸟氨酸脱羧酶活性。


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