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Toll样受体4及其配体脂多糖对骨髓间充质干细胞生物学功能的影响

赵强  
【摘要】:目的:观察不同浓度脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)对离体小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)功能的影响,并探讨脂多糖促进骨髓间充质干细胞增殖的可能机制。 方法采取野生型和Toll样受体4(Toll like receptor4,TLR4)基因缺失型小鼠骨髓以贴壁分离法培养骨髓间充质干细胞,取第3-6代的MSCs,通过流式细胞术检测MSCs表面标志显示CD34、CD45阴性;CD29、CD105、CD44阳性。以不同浓度LPS(0.1,1.0,5.0,10.0,20.0ug/mL)分别与野生型小鼠MSCs共培养24小时,分别采用Cell Count Kit-8比色法、annexin V/propidium iodide双染流式细胞术及双抗体夹心法观察LPS对MSCs增殖、抗凋亡及白介素-6分泌功能的影响,此外采用TLR4基因缺失小鼠MSCs与LPS1.0ug/mL共培养,探讨LPS促进MSCs增殖的可能机制。 结果适量的LPS能显著提高离体野生型小鼠MSCs的增殖、降低H2O2 /SD诱导的MSCs的凋亡、促进白介素-6的分泌(P0.05),LPS浓度在5.0ug/mL时对MSCs增殖功能影响最大,随着LPS浓度的继续增大,MSCs的增殖功能反呈下降趋势,但LPS20.0ug/mL组增殖能力仍高于对照组(P0.05);而LPS浓度在1.0ug/mL时能显著降低H2O2 /SD诱导的MSCs的凋亡,随LPS浓度的进一步增加,MSCs的凋亡比率也显著增加(P0.05);LPS可显著增加MSCs白介素-6的分泌(P0.05),但这种作用与LPS的浓度无关。LPS对Toll样受体4基因缺失小鼠MSCs增殖能力无显著影响。 结论适量的LPS能增强MSCs的增殖能力,抑制H2O2 /SD诱导的MSCs的凋亡,促进白介素-6的分泌,其促进MSCs增殖的机制可能是通过激活Toll样受体4信号通路实现的。


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