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阿司匹林对肠上皮细胞的损伤作用及机制探讨

安敏  
【摘要】:目的: 研究不同浓度阿司匹林(5mmol/L,10 mmol/L,20mmol/L)对肠上皮细胞株Caco-2细胞增殖、细胞屏障功能、细胞紧密连接蛋白Occludin表达以及细胞紧密连接及超微结构的影响,探讨阿司匹林引起肠上皮细胞损伤作用及其机制。 方法: 1将不同浓度的阿司匹林溶液(5mmol/L,10 mmol/L,20mmol/L)与肠上皮细胞株Caco-2共同培养24 h及48h,采用MTT法检测阿司匹林对Caco-2细胞增殖的作用。 2建立Caco-2单层细胞模型,采用不同浓度阿司匹林溶液(5mmol/L,10 mmol/L,20mmol/L)处理后,用EVOM电压电阻仪测定细胞跨膜电阻抗( TER)变化。 3应用免疫细胞化学法(EnVision法)检测细胞间紧密连接蛋白Occludin在Caco-2细胞间的表达。 4应用透射电镜观察不同浓度阿司匹林(5mmol/L,10 mmol/L,20mmol/L)作用后的Caco-2细胞超微结构及细胞紧密连接。 结果: 1随着浓度升高(5mmol/L,10 mmol/L,20mmol/L)及作用时间延长(0,24h,48h),阿司匹林对细胞增殖的抑制作用逐渐增大。 2随着浓度升高(5mmol/L,10 mmol/L,20mmol/L)及作用时间延长(0,24h,48h,72h),阿司匹林对细胞紧密连接的破坏作用逐渐增大。 3随着作用浓度升高,Caco-2细胞间Occludin表达逐渐下降,至20mmol/L时细胞间不表达,出现胞浆表达。 4随着作用浓度升高,阿司匹林对细胞完整性的破坏逐渐加重,细胞间隙逐渐增宽。 结论: 阿司匹林可抑制肠上皮细胞的增殖,同时损伤细胞屏障功能及紧密连接,并可直接引起细胞损伤,以上作用呈剂量和时间依赖性。


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