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人脑胶质瘤中HOXD10基因表达与临床意义的研究

李民  
【摘要】:研究背景: 近年来越来越多的研究者关注对人脑胶质瘤的基因研究,尤其是对人脑胶质瘤中同源盒基因的研究成为目前的热点。同源盒基因是一族含有共同的183个核苷酸序列的调节基因,根据同源盒的不同,可分为不同的类型,其中哺乳类动物的同源盒基因中可成簇排列在染色体上并按前后轴方式表达的一类基因,称I类同源盒基因,也称HOX基因(homeobox genes,同源盒基因)。HOX家族的基因发生突变,会造成个体发育以及组织器官的形成出现异常,甚至可以诱发细胞转化为恶性,最后形成肿瘤。HOX基因可分为HOXA、B、C和D四簇,分别位于4条不同的染色体上,它们与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关。近年来研究表明,HOXD10mRNA在胶质瘤细胞及胶质瘤组织中随着胶质瘤级别的增加而表达显著下降,其表达异常表明与胶质瘤的发生和发展可能有密切联系。 研究目的: 目前HOX家族基因在人脑胶质瘤细胞中及组织中的表达、生物学作用及其作用机制逐渐被多个研究所报道,但关于HOXD10在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义的报道并不多见。本实验旨在通过HOXD10基因在各级别胶质瘤组织及正常脑组织中表达,推断出HOXD10基因与胶质瘤发生和发展的相关作用,其表达水平有可能成为肿瘤检测指标,从而判断肿瘤的发展和预后,实施有效靶向治疗和个体化治疗。 研究方法: 1,运用RT-PCR及Western blot检测正常脑组织及脑胶质瘤组织中的HOXD的表达情况。 2,RT-PCR检测组织中HOXD10 mRNA水平表达:各等级胶质瘤组织及正常脑组织提取总RNA,计测RNA纯度,总RNA逆转录,将所得cDNA行反转录PCR扩增,分析检测出HOXD10 mRNA水平表达。 3,Western blot检测组织中HOXD10蛋白水平表达:将各级胶质瘤组织及正常脑组织用裂解,凝胶电泳分离蛋白,检测组织中HOXD10蛋白水平表达。 研究结果: 1,正常组织中HOXD10 mRNA呈高表达量,而Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤组织中HOXD10 mRNA的表达量显著低于Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤。 2,HOXD10蛋白在正常组织中的表达量亦明显高于胶质瘤,并且HOXD10蛋白在胶质瘤组织中的表达随胶质瘤级别的增高,其表达量呈递减趋势。 研究结论: HOXD10基因在正常脑组织中呈高表达,在人脑胶质瘤组织中呈低表达,且HOXD10基因在胶质瘤组织中的表达随胶质瘤级别的增高,呈下降趋势,并与脑胶质瘤恶性程度呈负相关。这提示HOXD10可能与胶质瘤的发生发展密切相关,HOXD10有可能为一种抑癌基因,并且可作为胶质瘤发展及判断预后的重要检测指标。


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