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雌激素调控的受体O型蛋白酪氨酸磷酸酯酶在肝细胞肝癌中的表达

侯嘉杰  
【摘要】:目的:1.检测PTPRO (Protein tyrosine phosphatase receptor-type O,受体O型蛋白质酪氨酸磷酸酶)在人类肝细胞肝癌(HCC)中的表达水平,研究该基因的表达是否具有性别差异,观察其与HCC切除术后肿瘤复发的相关性,阐明是否可以作为判断预后的指标;2.检测雌激素受体(ER)在HCC中的表达水平及与PTPRO的相关性,研究雌激素信号通路对PTPRO表达的调节作用。 方法:1.利用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和免疫组织化学(IHC)方法,分别检测59例男性及22例女性HCC患者肿瘤组织及癌旁组织中PTPRO及雌激素受体的表达水平;2.通过t检验分析PTPRO、ER在肿瘤、瘤旁及不同性别间的表达差异,并通过相关性分析及F检验了解PTPRO表达与ER是否具有相关性;3.通过Kaplan-Meier曲线研究不同PTPRO表达水平与HCC病人术后复发率之间的关系;4.利用慢病毒转染的方法构建ERα过表达的HCC细胞系Huh-7-ERα及SMCC-7721-ERα,并通过Real-time PCR及Western Blot检测PTPRO在细胞中表达水平的变化;5.克隆PTPRO启动子,利用PCR的方法构建启动子区域ERE(Estrogen responsive element)点突变,并通过荧光素酶报告基因技术检测ERE突变后启动子活性的变化,以研究ERα是否能调控PTPRO的转录。 结果:1. PTPRO、ERα在HCC中的表达较之癌旁及正常组织明显发生下调(P0.01);2. PTPRO及ERα在男性癌旁中的表达显著低于女性,且PTPRO水平与ERα呈明显正相关(P0.01);3. PTPRO表达水平与HCC切除术后复发呈显著相关(P0.01);4. PTPRO蛋白及mRNA表达水平在ERα过表达后的Huh-7-及SMCC-7721中发生明显上调(P0.001);5. PTPRO启动子区域ERE突变后,启动子活性显著下降(P0.001)。 结论:1. PTPRO在HCC中的表达发生明显下调,且具有显著的性别差异;2.PTPRO水平与HCC切除术后复发相关,可作为一项监测预后的指标应用于临床;3.在HCC中同样下调的ERα能在转录水平上调PTPRO表达,从而解释了PTPRO在HCC中的表达下调以及性别差异。


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