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Notch1在邻苯二甲酸二丁酯致雄性大鼠尿道下裂发生中的表达变化

周耀军  
【摘要】:目的:利用邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)胚胎期暴露诱导子代SD大鼠发生尿道下裂的实验动物模型,检测Notch信号通路中关键蛋白Notch1在尿道下裂雄性胎鼠与正常雄性胎鼠生殖结节(genital tubercle,GT)中的差异表达,初步探讨其在DBP致大鼠尿道下裂发生中的作用机制。 方法:孕SD大鼠20只,随机分为两组,实验组和对照组各10只。妊娠(gestational day,GD)14~18天,实验组和对照组分别每天给予DBP和大豆油800mg/kg灌胃,孕第19天剖宫产后统计雄性胎鼠出生体重(birth weight,BW)及肛门和生殖器之间的距离(anogenital distance,AGD),计算尿道下裂发生率。取DBP组中发生尿道下裂的雄性胎鼠和对照组中的雄性胎鼠,分为尿道下裂组与对照组,分别提取各组GT组织,用免疫印迹法和免疫组织化学法检测Notch1的表达及定位情况。 结果:实验组子代雄性胎鼠BW为(4.40±0.30)g,对照组为(6.11±0.40)g,实验组较对照组明显下降(P<0.05);实验组AGD为(2.17±0.18)mm,对照组为(3.28±0.16)mm,实验组较对照组明显缩短(P<0.05),尿道下裂发生率为42.9%。 Notch1在尿道下裂组的相对表达量为0.671±0.021(n=10),正常对照组为1.327±0.031(n=10),差异有统计学意义(P<0.05);Notch1主要定位于GT上皮细胞的胞质中,尿道下裂组染色强度明显弱于对照组。 结论:DBP染毒期间对胎鼠有明显毒性作用;染毒后DBP下调了GT中Notch1的表达,可能影响了GT发育过程中细胞增殖和凋亡的平衡,干扰了上皮—间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的过程,从而导致了尿道下裂的发生,但其具体功能有待于进一步研究。通过DBP致雄性胎鼠尿道下裂的动物模型,我们进一步探讨了尿道下裂的发生机制,为预防DBP的生殖发育毒性提供了线索。


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