美洲大蠊提取物制备工艺及其抗原性初步研究

【摘要】：目的：美洲大蠊是蟑螂过敏诱发哮喘的重要过敏源。目前尚缺乏系统的美洲大蠊提取物制备工艺研究。本文旨在开发出一种标准化的美洲大蠊提取物提取方法。方法：通过单因素试验观察不同盐离子浓度、pH以及提取时间对美洲大蠊提取物蛋白提取的影响,并通过正交设计对提取工艺进行优化。同时应用免疫印迹法检测美洲大蠊提取物内各种主要美洲大蠊主要过敏原的情况。结果：各因素对美洲大蠊蛋白提取效率影响大小的顺序为：盐浓度时间pH。其中盐浓度对提取物中蛋白浓度的影响最大,差异有统计学意义(P0.05)。美洲大蠊提取物的最佳提取条件为：提取液为磷酸盐缓冲液(PBS),盐浓度为0.4mol/L、pH为8.0、提取时间为6 h。结论：本研究开发出一种美洲大蠊提取物的标准化提取方法,为研究美洲大蠊过敏机制及其诊断与治疗提供了有利工具。