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大鼠部分肝移植供肝体积预测及脾切除预防缺血再灌注损伤的研究

陆森  
【摘要】: 背景 供肝的匮乏是阻碍我国肝移植发展的重要原因之一,部分肝移植是缓解供肝匮乏的有效方法,适合我国的国情,国外活体肝移植于二十世纪八十年代开始开展,主要在欧美和日本等国家,我国在这方面研究近几年刚刚起步,有关部分肝移植术后缺血再灌注损伤的研究较少,有必要进行深入的研究。 目的 研究大鼠肝脏CT扫描结果与实际肝脏重量和体积的关系,建立术前术后间接预测肝脏体积的方法。在此基础上建立大鼠原位部分肝移植模型,观察受体对部分肝移植和全肝移植缺血再灌注损伤耐受的差异,并用脾切除作处理因素,研究脾切除对部分肝移植缺血再灌注的影响,就其作用机制进行探讨。 方法 30只SD大鼠用肝脏CT扫描的方法测定肝脏的体积,同时测定大鼠的体重,处死大鼠后测定鼠肝的重量、体积及各叶的重量,用直线回归的方法探讨肝脏重量与肝体积、体重、体表面积及CT测定肝体积的关系。清洁级SD大鼠108只,雌雄各半,体重220~300克,供体略小于受体,随机分成3组,A组36只,18对供受体间原位全肝移植;B组36只,18对供受体间原位部分肝移植,切除移植肝左外叶和乳头状叶(根据第一部分约占肝重的38.5%);C组36只,18对供受体间原位部分肝移植加脾切除,肝切除量同B组。各组在手术结束后30、90、180min时分别处死6只,取肝脏标本,立即放入10%中性福尔马林中固定12-24小时,常规石蜡包埋,TUNEL法检测细胞凋亡、免疫组化(SP法)检测Bax表达;另于180分钟,每组2例,取肝组织约0.5cm~3,切成0.1cm~3立即放入质量浓度2.5%戊二醛中固定,透射电镜观察。 口京医科大学硕上学位用文 结果 30只大鼠肝脏重量门1.14 ti.55乃与肝脏体积 (11.2 0 if.51)cm’数值基本相等,肝脏各叶重量占全肝重量 中的比例相对恒定,肝脏重量与大鼠体重、体表面积及 CT测 定的肝脏体积分别具有线性依存关系(P刎.01厂CT预测各 叶肝重与肝脏各叶重量之间差异无显著性u叩.05)。结果表 明,部分肝移植的 180Inin细胞凋亡计数为 30.2人较全肝移植 明显增多(P叩.05),考虑可能与相对高的.门静脉血流量有 关。用脾切除来降低门静脉的压力,当门静脉血流恢复后,新 肝接受的血流相对减少。结果表明,脾切除后,肝细胞凋亡明 显减少。本实验结果表明,部分肝移植术后Bax基因表达在 180minF性细胞约 36.2%,较全肝移植明显增力(P<0.05),脾 切除后有所减少,提示脾切除对部分肝移植细胞凋亡可能具有 保护作用。A组全肝移植后电镜下见:肝细胞线粒体大部分完 整,略肿大,肝窦内皮细胞轻度水肿,可见髓鞘样改变,B组 18 omin时见胞浆灶性坏死、溶解,肝窦内皮细胞水肿、溶 解,K叩pfer细胞活跃,肝窦狭窄,充满细胞碎片;C组较 B 组改变轻,经脾切除有效降{趴肝血流后明显好转,说明脾切 除可改善肝窦内娜环状态。 结论根据大鼠的体重、体表面积及CT扫描肝体积与大鼠 肝重相关关系,可以预测大鼠各叶肝重,用于部分肝移植的实 验研究,大鼠肝脏 CT扫描可以比较准确地估计鼠肝的体积, 较之其它方法更加可靠、精确。部分肝移植较全肝移植术后缺 血再灌注损伤引起的细胞凋亡更为明显,脾切除可以改善部分 肝移植术后的缺血再灌注损伤,Bax蛋白表达于大鼠肝细胞 浆,部分肝移植术后B。蛋白表达高于全肝移植,参与了缺血 再灌注损伤引起的细胞凋亡,值得进一步深入研究。


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