IκB与核因子-κB在免疫性肝损伤发生发展中的作用

【摘要】： 目的 核因子-κB(nuclear factor koppa B,NF-κB)是一种重要的诱导转录因子，在免疫、炎症、肿瘤等病理过程中起重要的作用。因此，本实验探讨了NF-κB抑制蛋白(IκB)、NF-κB及其调节的细胞因子TNFα、诱导性一氧化氮合酶(iNOS)及NO等在刀豆蛋白A(Concanavalin A,ConA)诱导的免疫性肝损伤中的作用。方法 1)第一组：雄性BALB／c小鼠尾静脉注射PBS作为对照组；第二组：雄性BALB／c小鼠尾静脉注射刀豆蛋白A(20mg／kg)，制备小鼠免疫性肝损伤模型；第三组：刀豆蛋白A注射前30分钟腹腔注射NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫代甲酸盐(Pyrrodine dithiocarbamate,PDTC)(120mg／kg)，以阻断NF-κB的激活。2)Western blotting检测肝组织中NF-κB、IκB、iNOS在PDTC预处理前后的变化；3)同位素检测组织及血浆中TNFα的变化，用硝酸还原酶法检测组织中NO的含量；4)采用DNA ladder检测凋亡的存在，HE病理切片观察是否有坏死的产生。结果 ConA引发明显的肝细胞损伤，血浆中ALT含量显著增加；肝细胞胞浆中IκB在ConA刺激1小时后明显降解，同时胞核中NF-κB明显增加；胞浆中iNOS含量在ConA损伤1小时明显增加，相应诱导产生的NO的含量也明显增加；组织与血浆中TNFα明显增加，病理切片和DNA ladder可见明显的肝细胞坏死与凋亡。在PDTC预处理组未见IκB的降解，NF-κB核转入明显减少，iNOS未见增加，TNFα、NO的产生明显减少，肝损伤减轻。结论 NF-κB及其抑制蛋白IκB通过调控细胞因子TNFα、NO等的产生而诱导肝细胞损伤，PDTC可以通过抑制NF-κB激活来抑制这种改变。