收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

蚊抗药性相关新基因NYD-Ch和NYD-Tr的初步功能研究

顾燕  
【摘要】:【目的】研究抗药性相关糜蛋白酶基因(NYD-Ch)和胰蛋白酶基因(NYD-Tr)与抗药性之间的关系。 【材料和方法】采用PCR方法,以淡色库蚊抗性品系cDNA文库为模板,扩增出抗性品系中高表达的NYD-Ch和NYD-Tr,经T/A克隆测序鉴定后,扩增纯化质粒,经酶切后纯化目的片段亚克隆到真核表达载体pIE1-3中,用PCR结合酶切鉴定,核酸测序验证。将上述重组表达载体分别单独转入和共转入蚊细胞,经筛选获得稳定转染的细胞系,RT-PCR和Western blotting鉴定目的基因的稳定表达,并用MTT和流式检测稳定表达的细胞对溴氰菊酯杀虫剂的敏感性。 【结果】成功构建昆虫细胞表达载体并建立稳定转染细胞系,使目的基因在其中稳定表达。MTT结果显示:pIE1-3/NYD-Ch单独转染组,细胞存活率与对照组无显著性差异(p0.05);pIE1-3/NYD-Tr单独转染组,120μM溴氰菊酯浓度时,其细胞存活率较空载体组和未转染组分别增加38.20%(p0.05)和9.66%(p0.05);pIE1-3/NYD-Ch和pIE1-3/NYD-Tr共转染组,120μM溴氰菊酯浓度时,其细胞存活率较空载体组和未转染组分别增加67.37%(p0.01)和38.83%(p0.001);160μM药物浓度时,其细胞存活率较空载体组和未转染组分别增加48.83%(p0.05)和24.26%(p0.05)。 【结论】NYD-Ch和NYD-Tr在细胞对抗溴氰菊酯的毒性作用中有一定的保护力,提示NYD-Ch和NYD-Tr与抗药性相关。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 纪标,任培上,唐银,熊宏恩,谭立;伤寒沙门氏菌的裂解气相色谱分析[J];微生物学通报;1992年06期
2 王小东;康丽华;毛慧玲;江业根;马海滨;;两株高效相思根瘤菌的抗药性研究及其质粒组成分析[J];生物技术;2006年01期
3 张丕奇;韩增华;张介弛;戴肖东;孔祥辉;马庆芳;;6个杏鲍菇菌株生理生化研究[J];生物技术;2006年04期
4 宋春满;邓建华;吴兴富;雷朝亮;;云南主要烟区烟蚜种群解毒酶活力比较[J];昆虫天敌;2006年02期
5 谢玉英;李绪友;;警惕细菌的抗药性[J];中国科技信息;2007年09期
6 李道静;沈佐君;;二氢叶酸还原酶与肿瘤耐药[J];生命的化学;2010年06期
7 孔祥福,程莉莉,陈孝康;大肠杆菌抗药性质粒pFD10和pFD11的fi特性的测定[J];科学通报;1981年11期
8 孙耘芹;害虫的抗药性:Ⅱ.侦测锦铃虫抗药性的方法[J];昆虫知识;1982年02期
9 许雄,李开煌,李砚芬,蒙启枝,李丽英;稻螟赤眼蜂抗药性品系培育初报[J];昆虫天敌;1986年03期
10 郭丽,沈孝兵;病媒昆虫抗药性产生的分子机制[J];中国媒介生物学及控制杂志;2005年03期
11 王崇利;武淑文;杨亦桦;吴益东;;东南沿海地区小菜蛾对Bt δ-内毒素和Bt制剂的抗性检测[J];昆虫学报;2006年01期
12 黄水金;唐秋庚;;寄主植物对斜纹夜蛾酯酶和乙酰胆碱酯酶活性的影响[J];华东昆虫学报;2006年03期
13 徐云泉,曾素芬;常见霉腐真菌的抗药性比较[J];微生物学通报;1984年01期
14 魏岑,黄绍宁,范贤林,孙小平,王文来,刘正文,陈广泉;麦长管蚜的抗药性研究[J];昆虫学报;1988年02期
15 孙海虹,马同锁,于珊,赵宝华;鸡大肠杆菌的菌株鉴定及药物敏感试验[J];河北师范大学学报(自然科学版);2005年06期
16 林珠凤;罗礼智;潘贤丽;;杀虫剂使用失当是甜菜夜蛾大发生的重要原因[J];昆虫知识;2007年03期
17 龚佑辉;吴青君;张友军;徐宝云;;西花蓟马的抗药性及其治理策略[J];昆虫知识;2010年06期
18 邓家波;严慧娟;杨光友;牛李丽;王强;余建秋;余星明;王帅;陈维刚;;圈养长颈鹿线虫抗药性的初步检测[J];四川动物;2011年02期
19 何琪杨;张鸿卿;姜兵;薛绍白;;汉防己甲素有效地逆转肿瘤细胞抗药性[J];北京师范大学学报(自然科学版);1991年03期
20 王宜林,李宏;抗除草剂转基因植物的研究现状[J];生物学通报;2005年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 付彩兰;;农田抗药性杂草综合治理[A];河南省植物保护研究进展Ⅱ(下)[C];2007年
2 龚林根;张念环;张景飞;屈惠良;;二化螟抗药性综合治理技术研究初报[A];水稻螟虫灾变规律及治理对策研讨会论文集[C];2001年
3 王树礼;;抗药性及虫龄增长对棉铃虫防治的影响[A];全国安全用药技术研讨会论文集[C];2001年
4 吴华新;韩敏晖;沈群超;;棉铃虫抗药性的动态监测及综合治理[A];第十九届全国植保信息交流暨农药械交易会论文集[C];2003年
5 马德英;Kevin Gorman;Ian Denholm;罗万春;;新疆B型烟粉虱的抗药性及其治理策略[A];科技创新与绿色植保——中国植物保护学会2006学术年会论文集[C];2006年
6 鲁玉杰;石东;郭云峰;;储粮书虱抗药性及害虫再猖獗的研究现状与进展[A];华中三省(河南、湖北、湖南)昆虫学会2006年学术年会论文集[C];2006年
7 刘祥英;聂荣;刘环瑞;李琼轩;莫湿羽;;湖南省水稻褐飞虱对氯胺磷抗药性监测[A];华中昆虫研究(第6卷)[C];2010年
8 田海生;马磊;沈波;李秀兰;朱昌亮;;用SSH结合cDNA芯片分离、鉴定蚊虫抗药性相关基因[A];昆虫学创新与发展——中国昆虫学会2002年学术年会论文集[C];2002年
9 王岩;冯明鸣;刘鹏飞;刘西莉;;黄瓜霜霉病菌对烯肟菌酯敏感性及其抗药性突变体生物学性状研究[A];中国植物病理学会2005年学术年会暨植物病理学报创刊50周年纪念会论文集[C];2005年
10 杨俭美;李令媛;董波;周辉;;用比色和聚丙烯酰胺凝胶电泳法监测家蝇抗药性的初探[A];北京昆虫学会成立四十周年学术讨论会论文摘要汇编[C];1990年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 公茂庆;蚊抗药性相关基因克隆与功能研究及用RNAi抑制蚊抗药性的初步研究[D];南京医科大学;2005年
2 王波;血红素加氧酶-1活性变化对肿瘤细胞体外抗药性、体内生长影响的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
3 高鹏;反义核酸逆转乳腺癌细胞多药耐药的研究[D];山东大学;2004年
4 王彦华;褐飞虱对吡虫啉抗性监测及治理与高毒农药替代药剂室内筛选[D];南京农业大学;2008年
5 周小霞;东亚飞蝗乙酰胆碱酯酶基因克隆及其功能研究[D];重庆大学;2009年
6 黄星;甲磺隆降解菌与抗性菌的筛选及其相关基因的克隆[D];南京农业大学;2006年
7 张传清;三环唑防治稻瘟病的作用机制与抗药性研究[D];南京农业大学;2005年
8 詹儒林;芒果炭疽病菌抗药性基因tub2的克隆及其转化金龟子绿僵菌的初步研究[D];华南热带农业大学;2007年
9 邱高辉;麦长管蚜对吡虫啉的抗性及其机理研究[D];南京农业大学;2007年
10 陈松;与氰戊菊酯抗性相关的棉铃虫细胞色素P450基因的克隆及异源表达[D];南京农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 顾春波;烟蚜的抗药性检测及机理研究[D];山东农业大学;2005年
2 胡燕;烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的抗性风险研究[D];山东农业大学;2007年
3 帅霞;桃蚜Myzus persicae(Sulzer)对两种杀虫剂的抗药性选育及其机理研究[D];西南农业大学;2005年
4 罗伏林;山羊线虫的丙硫咪唑抗药性快速检测方法研究与四川省山羊线虫的抗药性调查[D];四川农业大学;2005年
5 张莉;江苏地区棉花烟粉虱种群研究[D];扬州大学;2008年
6 郭小芳;6株生防放线菌的生物学习性及防病抑菌作用研究[D];西北农林科技大学;2005年
7 钟立军;吉林省部分地区鸡球虫病流行病学调查及抗药性研究[D];吉林大学;2005年
8 陈利纳;不同品系烟粉虱对辛硫磷和阿克泰抗性机理研究[D];河北农业大学;2006年
9 许传勇;膀胱组织中MDR1和MRP基因表达研究[D];青岛大学;2005年
10 王兰英;生防放线菌的分离筛选及鉴定[D];内蒙古农业大学;2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 晓凡;提前预知细菌的抗药性[N];中国商报;2002年
2 王艳红;青蒿素面临抗药性威胁[N];医药经济报;2005年
3 冯海宁;打击楼市权钱交易,不能助长其抗药性[N];第一财经日报;2007年
4 庄北宁;传染病患者无视警告乘机,备受谴责[N];新华每日电讯;2007年
5 本报记者  赖强;青蒿素抗药性改写产业竞争导向[N];医药经济报;2005年
6 庄愉;不让BlaR1得逞[N];医药经济报;2002年
7 新文;全球流感病毒抗药性有增强趋势[N];医药经济报;2008年
8 刘静;抗药性结核病继续扩散[N];中国高新技术产业导报;2001年
9 庄愉;打掉抗药性盾牌逼HP投降[N];医药经济报;2000年
10 袁松范;哈佛大学发现四环素类药物合成新途径[N];中国医药报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978