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CD8~+T细胞在呼吸道合胞病毒诱导的哮喘中的作用研究

蒋雄斌  
【摘要】:第一部分HeLa细胞、Hep-2细胞、Vero细胞对呼吸道合胞病毒的敏感性比较 目的:比较人子宫颈癌细胞(HeLa)、人喉癌上皮细胞(Hep-2)、绿猴肾细胞(Vero)对呼吸道合胞病毒(RSV)的敏感性。方法:采用RSV分别接种HeLa、Hep-2、Vero三种不同细胞,观察细胞病变效应(CPE)出现时间及特征。直接免疫荧光(DFA)法测定病毒抗原表达。逆转录多聚酶联免疫(RT-PCR)法检测各细胞中病毒相对含量。结果:接种病毒后,HeLa、Hep-2细胞CPE出现最早(第五天),Vero细胞CPE最迟(第七天),但HeLa细胞表现为细胞肿胀、变圆,并不形成合胞体,而Hep-2细胞、Vero细胞可见明显的合胞体形成。DFA试验显示HeLa细胞(?),Hep-2细胞(?),Vero细胞(?);RT-PCR分析显示RSV在Hep-2细胞中表达最高。结论:三种细胞对RSV的敏感性不同,其中Hep-2细胞对RSV敏感性最高,并且CPE具有明显不同的形态特征,可作为进行RSV研究的优先选择细胞。 第二部分 呼吸道合胞病毒诱导致敏小鼠建立重症哮喘模型 目的:探讨用呼吸道合胞病毒(RSV)诱导致敏小鼠建立重症哮喘模型的方法,评价该模型的病理生理特征。方法:随机将40只Balb/C小鼠分为4组:磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、卵白蛋白(OVA)组、RSV组和OVA/RSV组。采用OVA腹腔注射致敏、结合OVA持续雾化吸


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