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石菖蒲活性成分β-细辛醚对H_2O_2诱导的PC12细胞损伤的保护作用及机制研究

黑鑫鑫  
【摘要】:目的:探究β3-细辛醚对H2O2诱导PC12细胞损伤的保护作用及潜在机制。方法:用MTT法检测不同浓度H2O2对PC12细胞活性的作用,筛选合适H202浓度构建PC12细胞氧化损伤模型;MTT法检测β-细辛醚干预后H2O2诱导PC12细胞的存活率,采用DCFH-DA荧光探针检测β3-细辛醚干预后H2O2诱导PC12细胞ROS含量,分光光度法检测β-细辛醚干预后H2O2诱导PC12细胞LDH含量以及MDA、CAT、SOD和GSH活性;通过RT-PCR技术检测PC12细胞中Nrf2和HO-1的mRNA表达情况;通过Western Blot技术检测PC12细胞内Nrf2和HO-1的蛋白表达情况;运用siRNA转染技术干扰Nrf2表达,利用MTT法检测干扰Nrf2表达后β-细辛醚干预PC12细胞的活性,利用分光光度法检测干扰Nrf2表达后β3-细辛醚干预PC12细胞中MDA及SOD活性。结果:H2O2处理的PC12细胞存活率显著降低,LDH活性显著提高;加入β-细辛醚干预后,PC12细胞存活率显著提高,LDH活性显著降低,β-细辛醚对H2O2诱导PC12细胞的损伤表现出保护作用;β-细辛醚可以降低H202诱导PC12细胞中氧化损伤标记物ROS含量和MDA活性并且提高细胞中抗氧化物SOD、GSH和CAT活性;β-细辛醚上调H2O2诱导PC12细胞内Nrf2和HO-1的mRNA及蛋白表达水平;转染si-Nrf2以干扰PC12细胞中Nrf2的表达,β-细辛醚对H2O2诱导的PC12细胞活性的保护作用被抑制,细胞中MDA活性上升并且SOD活性下降。结论:β-细辛醚对H2O2诱导的PC12细胞氧化应激损伤具有保护作用,其潜在机制可能主要是通过上调Nrf2/HO-1信号通路的表达实现。


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