狼疮静颗粒对活动性SLE细胞粘附分子-1表达的实验和临床研究

【摘要】： 系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种多因素参与的特异性自身免疫性疾病，我国的发病率为70.4/10万，有报告显示妇女则达到115/10万。该病病程迁延，反复发作，呈慢性经过，累及多系统、多脏器，肾功能衰竭、感染及中枢神经系统的损害是其死亡的主要原因，严重威胁着患者的健康和生命，是困扰医学界的难题之一。“狼疮静颗粒”(Langchuangjing Granule,LG)是治疗SLE有效的纯中药制剂。本文在前期研究基础上，以细胞粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1 or CD54)为主要观察对象，从实验和临床两方面进行了研究，并试图阐述其治疗SLE的作用途径、环节和靶点。 实验研究分药理学和毒理学研究两部分。药理学研究选用先天发病的NZB/W F1(NZB/NZW F1 or BW)自发性狼疮小鼠，分别检测了血清、外周血淋巴细胞、单核细胞和肾组织ICAM-1的表达情况。结果显示，3mo NZB/W F1♀小鼠血清可溶性细胞粘附分子-1(soluable intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)含量尚在正常范围，尿蛋白阴性、肾脏普通组织形态未见明显异常，但外周血淋巴细胞和单核细胞表面以及肾脏组织已见ICAM-1高表达；至7mo时，NZB/W F1♀小鼠血清sICAM含量明显升高，尿蛋白和肾功能异常。狼疮静能有效抑制NZB/W F1♀小鼠外周血淋巴细胞、单核细胞表面和肾组织ICAM-1的高表达以及肾小球细胞数和血清sICAM-1的升高，并能降低尿蛋白、改善肾功能和增加免疫脏器指数。狼疮静结合西药强的松后，起到了协同作用，显示了中西医结合的明显优势。毒理学研究观察了灌胃给药途径的狼疮静颗粒LD_(50)及最大耐受量试验。结果狼疮静颗粒因为制剂的原因LD_(50)无法完成，其最大耐受量为304g生药·kg~(-1)·日~(-1)，相当于临床剂量的87倍，提示狼疮静颗粒安全无毒。 临床研究选择符合诊断标准的活动性SLE患者46例，随机分为西药组(Western medicine,WM)20例和狼疮静为主治疗的中西医结合组(LG+WM)26例，治疗6个月，观察对临床疗效和SLAM病情活动性积分的影响；引入激素指数和CTX指数，分析狼疮静颗粒对西药的撤减作用；同时观察患者治疗前后血清sICAM-1的变化。结果显示，中西 南京中医药大学博士学位论文·摘要 医结合组和西药组治疗后血清sICAM一1均明显降低，与治疗前比较有 显著性差异(P0.001，0.01);中西医结合组在临床疗效、降低病情活动 性积分、减少激素及免疫抑制剂用量等方面，明显优于西药组。 以上结果表明狼疮静可以有效抑制ICAM一1的升高，当结合西药 后，发挥了协同作用，提高了疗效，符合系统论的最优化原则。提示 狼疮静颗粒具有类激素样或抗粘附分子样作用，其疗效机制与抑制 ICAM一1的升高，下调 sIL一ZR、TNF一a等细胞因子的表达，从而抑制了 T、B细胞过度活化和炎症细胞浸润，改善T、B细胞功能紊乱，减少 了自身抗体和免疫复合物的过多形成有关。其确切机理尚有待进一步 研究。 本文从细胞及分子免疫角度，运用流式细胞技术和免疫组化法来 观测纯中药制剂对先天发病的NZB/N ZWFI自发性狼疮小鼠ICAM一1 的作用，国内外尚属首次，具有创新性。同时，进一步证明该中药制 剂安全无毒、临床疗效确切，为开发新药奠定了基础。