收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

基于TiO_2—多孔硅的蛋白质芯片技术检测谷物中的多元真菌毒素

蔡婷婷  
【摘要】:食物中真菌毒素的污染一直是全球关注的问题。真菌毒素是由一些丝状真菌产生的有毒次级代谢产物,在低浓度下就会导致人和动物患病。它们的作用范围包括细胞毒性,肾毒性,肝毒性,致畸性,致突变,致癌和免疫抑制。而且饲料及食物中往往存在多种真菌毒素,危害更大。一般通过色谱法、免疫测定或传感器检测真菌毒素。色谱法虽然具有较高的灵敏度和准确性,但成本高、分析时间长、样品处理繁琐和对技术人员要求较高,使其存在一定的局限性。而多孔硅比表面积大,结合位点多,应用于检测真菌毒素时,样品处理简便。因此,本文以多孔硅为载体,以免疫分析为基础,建立一种蛋白质芯片技术来检测谷物中的多元真菌毒素。本文以P型单晶硅为材料,通过电化学刻蚀法制备多孔硅。首先对刻蚀的波形进行了选择,确定为方波刻蚀。然后,为了增加多孔硅的稳定性,在表面旋涂了一层TiO2,对比了涂Ti02前后硅片与蛋白质的结合能力。并分别用醛基、羧基和环氧基修饰多孔硅,结果表明用环氧基修饰的效果更好。接着分别优化了 OTA、AFB1和FB1的完全抗原、一抗和荧光二抗(Cy3-IgG)的浓度,最终确定OTA-BSA、AFB1-BSA和FB1-BSA的浓度依次为200、100和200μg/mL,OTA-Ab、AFBi-AbFBi-Ab 的浓度依次为 200、100、200Oμg/mL,对应荧光二抗的浓度均为60μg/mL。并根据优化的条件制作了三种真菌毒素的标准曲线,其中OTA的检测线性范围为0.01-10 ng/mL,线性方程为y=-1576.3675 log(x)+8761.3079,R2 = 0.999,检测限为 32.6 pg/mL;AFBi 的检测线性范围为 0.001-1 ng/mL,线性方程为 y=-1584.1929 log(x)+6743.3798,R2 = 0.985,检测限为 0.314 ng/mL;FB1的检测线性范围为 0.01-10 ng/mL,线性方程为 y=-1187.7643 log(x)+9179.6908,R2 =0.992,检测限为0.197 ng/mL。该方法的批内精密度RSD为11%以下,批间精密度为13%以下。另外,以OTA为例对特异性进行了分析,结果表明,该方法对OTA有良好的特异性,与其结构类似物OTB之间没有明显的交叉反应。并分别用本方法和ELISA方法测定了大米、小麦和玉米中OTA的加标回收率,用本法测定的9个样品中有7个样品回收率在80-120%之间,与用ELISA方法测定的回收率基本一致,说明本法用于检测谷物中的真菌毒素具有可行性。在建立的检测单种真菌毒素方法的基础上,根据最优反应条件,建立了同时检测多元真菌毒素的方法,对比了两种不同的混合反应体系对检测结果的影响。结果表明,将混合真菌毒素分别和抗体混合的方式测得的标准曲线线性范围更广,达2-3个数量级。该方法同时检测OTA、AFB1、FB1的线性检测范围依次为0.01-1、0.001-1、0.01-1 ng/mL。并对多重特异性进行了分析,结果表明抗原抗体特异性较好。然后,分别用本法和ELISA方法测定了 OTA、AFB1和FB1混合真菌毒素在大米、玉米和小麦中的加标回收率,结果表明,两种方法测定的回收率基本一致,说明本章建立的同时检测多元真菌毒素方法应用于谷物中多元真菌毒素的检测具有可行性。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 ;真菌毒素的危害、限量标准及快速定量检测方法[J];食品安全导刊;2017年22期
2 巩慧颖;;针对粮油产品略析其真菌毒素的检测工作[J];食品界;2017年03期
3 本刊编辑部;杨珏青;司慧;陈慧;;粮食中的真菌毒素[J];食品与生活;2017年09期
4 王海涛;;粮食中真菌毒素快速定量检测方法应用研究[J];饮食科学;2017年08期
5 钱雪松;第三届国际真菌毒素大会[J];国外医学(卫生学分册);2000年01期
6 罗毅,肖丽媛,曹金鸿;发霉玉米中真菌毒素的分析[J];卫生毒理学杂志;1988年01期
7 李丽云;;减少饲料中真菌毒素的方法[J];国外畜牧学(饲料);1988年04期
8 金立志;检测真菌毒素的新方法[J];郑州粮食学院学报;1989年03期
9 侃德秀;真菌毒素与食品安全[J];食品工业科技;1989年02期
10 谭洪波;;不同质量玉米中3种真菌毒素含量分析[J];食品安全导刊;2018年03期
11 李群伟;真菌毒素与人畜健康的研究现状及展望[J];中国预防医学杂志;2004年05期
12 王文珺;桑华春;;真菌毒素免疫检测技术的研究进展[J];食品安全导刊;2017年16期
13 陈云良;;粮食中真菌毒素检测技术研究进展[J];食品安全导刊;2016年12期
14 谢丽伟;孔维军;杨美华;欧阳臻;;体内真菌毒素生物标记物检测方法的研究进展[J];世界科学技术-中医药现代化;2013年03期
15 付月华,瞿明仁,宋国华;畜禽饲料真菌毒素的预防[J];中国饲料;1998年12期
16 蒋孟圆;刘晓松;胡琳;马晓年;欧利华;张秀清;李文廷;;自制花椒调味油中11种真菌毒素的研究分析[J];中国调味品;2018年10期
17 张家宁;丁轲;韩涛;陈湘宁;郭思梦;;液质联用法检测饼干中4种单端孢霉烯类真菌毒素[J];食品安全质量检测学报;2015年06期
18 文辉;文虹;;饲料中主要真菌毒素的危害及控制[J];江西饲料;2010年05期
19 惠家政;;真菌毒素对动物的慢性影响[J];陕西农业科学;1979年10期
20 方银平;;粮油中真菌毒素检测技术及其应用[J];食品安全导刊;2018年20期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘楠;马新华;王莹;李晓丽;欧国荣;高志贤;;饮水与食品中多种真菌毒素同时检测的生物芯片技术研究[A];第12届生物毒素研究及医药应用学术大会论文集[C];2015年
2 王景林;;真菌及真菌毒素检测新技术[A];2013年饲料毒理学术报告会暨饲料毒理学专业委员会第五届全国代表大会材料集[C];2013年
3 刘楠;马新华;王莹;李晓丽;欧国荣;高志贤;;饮水与食品中多种真菌毒素同时检测的生物芯片技术研究[A];中国毒理学会第四届中青年学者科技论坛论文集[C];2014年
4 薛华丽;毕阳;蒲陆梅;唐亚梅;;超高压液相色谱串联质谱法同时测定硫色镰刀菌接种的马铃薯块茎中A型和B型单端孢霉烯族毒素[A];第十一届中国生物毒素研究及医药应用年会论文摘要集[C];2013年
5 薛华丽;毕阳;虎玉森;梁慧光;唐亚梅;;超高压液相色谱串联质谱法同时测定硫色镰刀菌接种的马铃薯块茎中A型和B型单端孢霉烯族毒素[A];甘肃省化学会第二十八届年会暨第十届中学化学教学经验交流会论文集[C];2013年
6 孔维军;刘秋桃;杨锡辉;杨美华;;中药中真菌毒素快速检测研究[A];第一届《药学学报》药学前沿论坛暨2015年中国药学会中药与天然药物专业委员会会议论文摘要集[C];2015年
7 王璟;李洪连;;植物真菌毒素与食品安全[A];河南省植保学会第八次、河南省昆虫学会第七次、河南省植病学会第二次会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
8 毛鑫涛;刘嫱嫱;靳钊;;真菌毒素检测的革命——高分子基亲和柱[A];第八届食品质量安全技术论坛论文集[C];2017年
9 高同春;王梅;段劲生;孙明娜;张勇;;食品中真菌毒素的研究进展[A];食品安全的理论与实践——安徽食品安全博士科技论坛论文集[C];2005年
10 高智谋;潘月敏;李艳梅;郭艳;;真菌毒素及其防除与利用[A];食品安全的理论与实践——安徽食品安全博士科技论坛论文集[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张慧杰;小麦真菌毒素在加工过程中的消解、转移规律研究[D];中国农业科学院;2014年
2 韩铮;中药材中常见真菌毒素分析方法学及代谢动力学研究[D];浙江大学;2011年
3 张勋;真菌毒素类高灵敏高通量快速检测方法研究[D];江南大学;2014年
4 杨振东;模式生物秀丽隐杆线虫评价真菌毒素毒性毒理机制的研究[D];江南大学;2016年
5 王希春;农产品中两种真菌毒素蛋白质芯片检测技术的研究[D];南京农业大学;2010年
6 章先;农产品中四种常见真菌毒素免疫检测技术研究[D];浙江大学;2016年
7 张承启;新型杀菌剂氰烯菌酯对禾谷镰刀菌的作用机制研究[D];浙江大学;2016年
8 刘洪美;巴戟天中多农药残留检测及防霉变储藏规范研究[D];北京协和医学院;2016年
9 曹晓琴;动物体液和组织中真菌毒素检测关键技术及应用研究[D];武汉大学;2014年
10 谷祖敏;草茎点霉作为生物除草剂防除鸭跖草的潜力及环境生物安全评价[D];沈阳农业大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 蔡婷婷;基于TiO_2—多孔硅的蛋白质芯片技术检测谷物中的多元真菌毒素[D];南京师范大学;2018年
2 夏爽;真菌毒素细胞传感器评价方法建立及联合毒性研究[D];江南大学;2018年
3 范志辰;饲料中真菌毒素分析方法及在体内代谢转化的研究[D];上海海洋大学;2017年
4 郑翠梅;高效液相色谱—四级杆—飞行时间质谱法同时测定粮食中13种真菌毒素[D];山东农业大学;2012年
5 王小博;水产品中常见真菌毒素的污染调查及对虾中残留的风险评估[D];广东海洋大学;2017年
6 程玲;中药中农药及真菌毒素残留的色谱—质谱联用分析方法研究[D];浙江大学;2012年
7 张晓男;苹果及其制品中主要真菌毒素检测技术与风险评估研究[D];中国农业科学院;2017年
8 周健;快速样品前处理技术在食品真菌毒素等多组分检测中的应用[D];浙江工业大学;2017年
9 邓义佳;调控肝微粒体酶对鱼/虾中常见真菌毒素危害的消减机制[D];广东海洋大学;2016年
10 谢刚;粮食污染主要真菌毒素的研究[D];四川大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 海阳辉;食品中真菌毒素检测喜获新法[N];中国食品质量报;2008年
2 王振岭;三种真菌毒素可能与食管癌发生有关[N];中国医药报;2005年
3 王振岭;三种污染真菌毒素与食管癌有关[N];科技日报;2005年
4 本报记者 翟剑;真菌毒素防控刻不容缓[N];科技日报;2014年
5 本报记者 王薇;防控“潜伏性威胁” 真菌毒素迫在眉睫[N];中国食品报;2014年
6 黄明明;真菌毒素:比霉变更可怕的隐身杀手[N];工人日报;2014年
7 本报记者 马爱平;我粮食食品中实现真菌毒素快速精准检测[N];科技日报;2015年
8 马爱平;我国实现粮食食品中真菌毒素快速精准检测[N];粮油市场报;2015年
9 马爱平;粮食食品实现真菌毒素快速精准检测[N];中国食品安全报;2015年
10 本报记者 李松;真菌毒素对人类危害大 实施技术防控刻不容缓[N];中国食品报;2012年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978