β-catenin在肝硬化和肝癌组织中的表达、分布及功能研究

【摘要】： 肝硬化是一种常见的慢性肝病，是由一种或多种病因长期或反复作用，引起肝脏弥漫性损害。原发性肝癌是我国高发性恶性肿瘤，分布广转移率高。而且相当一部分原发性肝癌是由肝硬化发展而来的。本文选择β-catenin(β-连环蛋白)作为研究对象，研究了β-catenin在肝硬化和原发性肝癌中的异常表达分布情况以及在肝硬化发生发展过程中的作用进行了初步探讨，试图在细胞分子水平寻找一条治疗它们的新思路。1、β-catenin在肝硬化和肝癌患者肝组织中的表达、分布 我们通过免疫组化的方法检测了正常肝组织、肝硬化组织、癌旁肝硬化组织、肝细胞肝癌组织的β-catenin的表达、分布情况，发现β-catenin在肝硬化肝组织中的表达量(特别是膜分布)明显高于正常肝组织，在中、晚期肝硬化的表达量比早期肝硬化时明显增多。在癌旁肝硬化中β-catenin主要以细胞质和胞膜分布明显，少量细胞呈胞核分布，较肝硬化组织肝细胞胞质分布明显增加。在肝细胞癌中β-catenin在细胞质和细胞核分布明显，较癌旁肝硬化组织细胞核分布明显增加。β-catenin在正常肝组织、肝硬化组织、癌旁肝硬化组织、肝细胞肝癌组织中的分布表达变化提示着β-catenin生物学功能由结构蛋白向信号蛋白转变的过程。2、β-catenin与actin相互关系的研究 β-catenin作为结构蛋白无论在分布上还是在量的表达上都与actin蛋白存在一定的内在联系。我们通过免疫组化发现在肝硬化组织切片和LO2细胞中β-catenin与actin(包括α-SMA)蛋白存在位置上的共分布，通过免疫沉淀发现在肝硬化与正常肝组织中它们存在量的对应关系。3、β-catenin对肝硬化进程影响的研究 为了验证β-catenin在肝纤维中的分布变化，我们通过CCl_4制备动物模型来观察β-catenin的分布情况，发现90天模型鼠较40天模型鼠在肝细胞中出现较明显β-catenin的肝细胞膜分布。 为了验证β-catenin对肝硬化进程影响的研究，我们利用腺病毒载体重组野生型β-catenin感染肝纤维化大鼠，检测门静脉血流和门静脉压的变化。发现感染腺病毒的大鼠较肝纤维化模型鼠，门静脉压显著提高，门静脉血流却下降。 颀；卜：学位论文 提示p－catedn通过增加门静脉血口流阻力达到增加门静脉压的作用。同时我 们通过HE染色发现感染腺病毒的大鼠胶原纤维增生明显，假小叶形成，6 －cateni。通过在肝细胞膜表达分布的增加，导致l’刁静脉压升高，加重了肝硬化 的进程。导致这一变化的机理值得进一步研究。