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(一)hsTRAIL基因的克隆表达、载体选择及蛋白复性研究 (二)谷胱甘肽S-转移酶(GSTp)半胱氨酸的定点突变及其在293细胞中的功能研究

司马健  
【摘要】:采用PCR技术从人肝脏cDNA文库扩增出编码114-281位氨基酸的TRAIL基因片段(hsTRAIL),将之克隆至原核表达载体pET30a、pET25b和pJLA503中,构建成重组载体pET30a/hsTRAIL、pET25b/hsTRAIL和pJLA503/hsTRAIL,以上重组载体诱导表达后,SDS-PAGE鉴定显示pET30a/hsTRAIL系统表达效率最高,目的蛋白占菌体总蛋白含量的40%左右;采用透析法或梯度稀释法对hsTRAIL包涵体蛋白进行复性,结果显示梯度稀释法明显好于透析法;纯化后的hsTRAIL蛋白具有明显的生物学活性,效果与标准品相似。


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