特异性抑杀铜绿微囊藻的放线菌的研究

【摘要】：微囊藻水华是当前我国面临的一个非常严峻的环境问题。水华的控制尤其是生物控制是近年来研究的热点。本研究探讨了开发利用海洋放线菌资源来进行水华防治的新途径。 从江苏海洋滩涂土壤中分离到464株放线菌,对它们进行了铜绿微囊藻生长抑制筛选试验,得到18株放线菌活性菌株,经过进一步筛选得到NT0401,YC0412菌株,其胞外代谢产物对铜绿微囊藻具有较好的抑杀作用。 通过形态学特征、生理生化试验、细胞壁化学组分分析,以及16SrDNA序列分析,初步确定NT0401和YC0412分别为:灰色变异链霉菌(Streptomyces griseovariabilis)和球孢链霉菌黄褐变种(S. globisporus var. flavofuscus)。 比较研究了不同发酵条件对两株菌杀微囊藻活性成分产生的影响,结果为:在可溶性淀粉为碳源,KNO_3为氮源,pH为7.5,150mL/500mL装液量,28℃,150rpm NT0401发酵7天,YC0412发酵6天条件下,活性成分产生达到最高量。 通过对NT0401和YC0412活性成分进行初步的分离纯化,NT0401的活性成分是水溶性的,不溶于常见的有机溶剂,对本研究所测试的其它微藻及筛选抗生素的八种模式菌株(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、隐球菌、白色念珠菌、八叠球菌、毛霉菌、链球菌)的生长影响很小,该成分对微囊藻具有特异的抑杀能力。YC0412的活性成分是脂溶性的,对八个菌株的生长均有不同程度的抑制,同时也可以减缓集胞藻(Synechocystis PCC 6803),鱼腥藻(Anabaena PCC 7120)的生长,是一种广谱的抗菌物质。 同时从pH及温度两个方面初步测定了两种活性物质的稳定性。YC0412活性成分相对容易失活,NT0401稳定性较好。