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急性应激对海马Akt/FKHRL1信号通路活性改变的影响

崔久彩  
【摘要】:[目的]:考察急性应激诱导大鼠海马Akt/FKHRL1信号通路活性的改变及其时效性;探讨心理应激的大鼠模型。 [材料和方法]:1.实验动物:雄性SD大鼠,体重280±20g,每笼5只于动物房常规饲养。2.实验试剂:①一次抗体[P-Akt(Ser-473)、Akt(Ser-473)、P-FKHRL1 (Thr-32)、FKHRL1(Thr-32)],羊抗兔多克隆二次抗体;②增强型化学发光系统(enhanced chemiluminescent system, ECL)试剂盒;③大鼠ACTH放免试剂盒。3.实验方法:所有动物在饲养七天后随机分配为正常对照组(C)、躯体应激组(S)和心理应激组(PS)。对S组建立急性足底应激模型,对PS组通过让其看和听到同伴的应激制造心理应激模型,观察急性应激后大鼠海马Akt/FKHRL1信号通路的活性改变情况和其变化的时效性及应激后血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)的动态变化,并与对照组相比较。Akt/FKHRL1信号通路的活性用蛋白质印迹(Western blotting)方法测定其磷酸化水平。用放射免疫方法测定血浆ACTH浓度。用SPSS16.0统计软件对实验数据进行统计分析,血浆ACTH浓度及Akt/FKHRL信号系统表达程度皆用单因素方差分析进行检验。以P0.05为判断差异显著性的标准。 [结果]遭遇足底电击的大鼠表现为明显的ACTH改变(P0.001),说明应激造模是成功的,但Akt/FKHRL1信号系统活性未表现出统计学上的变化。心理应激组出现明显的行为学反应,但未见生明显物学指标变化。 [结论]1.本研究结果显示,足底电击可以成功制造大鼠的急性躯体应激模型,但在此实验模型中Akt/FKHRL1信号系统活性的变化不明显,提示该信号系统是否参与急性应激的调节过程还有待于继续研究;2.通过让大鼠看到、听到其它大鼠遭受电击而产生心理应激的大鼠模型有待进一步的探讨。


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