收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

miR-181a—CARF靶向关系在胰腺癌中的研究

李军建  
【摘要】:目的: 研究miR-181a在胰腺癌中的表达情况,验证miR-181a与CARF基因的靶向关系,并探讨其在该疾病中的功能,为阐明胰腺癌发病机制,寻求有效的治疗途径提供理论和实验依据。 材料和方法: 采用实时荧光定量PCR技术,检测并比较胰腺癌组织/细胞与正常胰腺组织/细胞中miR-181a的表达情况,通过转染miR-181a inhibitor下调PancⅠ胰腺癌细胞中miR-181a的浓度,分别用MTT试验评价肿瘤细胞增殖能力和FCM检测细胞凋亡状况。在生物信息学靶基因预测的基础上,构建携带CARF基因3'-UTR序列的PGL-3报告基因载体,利用双荧光素酶报告基因技术,验证miR-181a与CARF基因的靶向关系。同时,通过转染成熟hsa-miR-181a和miR-181a inhibitor分别上调和下调Panc细胞中miR-181a的浓度,观察CARF基因在转录及翻译水平的变化。用经上述处理的PaneⅠ细胞建立裸鼠胰腺癌皮下移植瘤模型,观察miR-181a浓度变化对PaneⅠ细胞体内成瘤能力的影响,并检测移植瘤中CARF基因在翻译及转录水平的表达情况。 结果: (1)相对于正常胰腺组织和器官,胰腺癌组织和细胞中miR-181a的表达水平明显升高(p0.05)。PancⅠ细胞转染miR-181a inhibitor后,PaneⅠ胰腺癌细胞中miR-181a的表达水平明显下调,MTT及FCM检测结果显示该组细胞相对于对照组细胞的增殖能力显著下降,细胞凋亡率明显上升。(2)基因测序结果表明,携带CARF基因3'-UTR序列的PGL-3报告基因载体构建成功,与成熟hsa-miR-181a共转于细胞后,荧光素酶活性较对照组明显下降,且与hsa-miR-181a浓度呈明显负相关;miR-181a浓度与CARF蛋白表达水平呈显著负相关,而与CARF mRNA水平无明显相关性。(3)经转染成熟hsa-miR-181a和niR-181a inhibitor的PaneⅠ细胞,所形成的皮下移植瘤的瘤体积、瘤重、抑瘤率无明显变化,CARF基因的蛋白和mRNA表达水平亦无明显变化。 结论: miR-181a在胰腺癌组织及细胞中表达明显上调,通过促进细胞增殖、抑制细胞凋亡发挥原癌基因样作用。CARF是miR-181a的靶基因,miR-181a通过下调该基因的表达促进胰腺癌的发展。如何稳定而有效地下调胰腺癌中miR-181a的表达水平,以达到生物治疗效果有待进一步探讨。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 王静,陆建平,刘崎,王莉,王飞,曾浩,金爱国,龚建国,王敏杰;不同MR快扫序列对胰腺肿瘤的诊断价值[J];胰腺病学;2001年01期
2 Kumar Manoj,刘正人,田锐,秦仁义;生长抑素受体2基因转染抑制胰腺肿瘤细胞生长机制的探讨[J];中华医学杂志;2004年09期
3 阎长青;郭俊超;廖泉;赵玉沛;;蛋白质组学及其在胰腺癌诊断治疗中的应用[J];国际肿瘤学杂志;2005年12期
4 郝继辉;;怀疑胰腺肿瘤 首选B超检查[J];医药与保健;2010年03期
5 席密;张啸;;内窥镜逆行胰胆管造影术诊断64例壶腹周围癌[J];实用肿瘤杂志;1991年03期
6 孙厚坦,赵夏夏;胰腺结核误诊为胰腺肿瘤一例报告[J];西北国防医学杂志;1992年02期
7 冯培勤;时玉忠;张传玺;;胰腺乳头状囊腺癌1例[J];山东医学高等专科学校学报;1992年04期
8 孙诚谊,张延龄,曹世龙,黄抗美,李栋良,蒋娉,倪洪珍;胰腺肿瘤DNA含量检测及生存分析[J];中华外科杂志;1994年06期
9 姚根有,陈培辉,来茂德,洪莉英;胰腺肿瘤九种神经内分泌标记物的观察[J];浙江大学学报(医学版);1995年02期
10 邓世荣,凌利霞;胰腺囊腺癌横结肠瘘1例[J];世界华人消化杂志;1996年08期
11 ;胰腺肿瘤[J];国外科技资料目录(医药卫生);1997年05期
12 白遵光,蔡炳勤,谭志健,刘晓雁;胰腺囊腺癌合并囊内出血1例报道[J];广州中医药大学学报;1998年S1期
13 ;胰腺肿瘤[J];国外科技资料目录(医药卫生);1998年10期
14 赵敏,贾青,姜若兰;生长抑素对人胰腺癌细胞株HS766T的生长调控[J];中华普通外科杂志;2002年03期
15 鲍洛文,倪耀忠;胰腺癌的区域性动脉灌注化疗[J];肝胆胰外科杂志;2002年02期
16 王浩;腹腔镜在胰腺癌分期中的应用(文献综述)[J];国外医学.外科学分册;2002年05期
17 孙建,倪泉兴,傅德良,虞先俊,姚琪远,张延龄;胰腺癌介入化疗后组织病理学改变及其意义[J];腹部外科;2003年04期
18 高德明,马庆久,赖大年,鲁建国,何显力,褚延魁,武永忠,梅乐园,何泽生;126例胰十二指肠切除术的经验[J];中国普通外科杂志;2003年03期
19 彭承宏,王涌,吴存造,唐喆,刘颖斌,吴育连,方河清,彭淑牖;标准和扩大胰十二指肠切除术治疗壶腹周围癌的临床对照研究[J];中华肿瘤杂志;2004年02期
20 曹文洪,丁庆国,赵芳,夏逸星,唐利吉,王晓燕;螺旋CT双期扫描在胰腺肿瘤中的应用价值[J];实用医学影像杂志;2004年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王国慧;Eddie W.F.Lau;Ramdave Shakher;Peter Eu;Val Johnston;Rodney J.Hicks;;~(177)Lu-octreotate对神经内分泌胃肠胰腺肿瘤的SPECT初步显像研究[A];首届全国肿瘤核医学新技术研讨会论文集[C];2007年
2 王玲;蒋天安;陈芬;赵齐羽;敖建阳;;胰腺实性假乳头状瘤的超声诊断[A];2011年浙江省超声医学学术年会论文汇编[C];2011年
3 于淼;向红丁;许岭翎;王鸥;邢小平;;胰升糖素瘤12例临床特点分析[A];2008内分泌代谢性疾病系列研讨会暨中青年英文论坛论文汇编[C];2008年
4 张人超;姜朝晖;方晓明;盛玉才;方旭东;牟一平;;胰腺实性假乳头状肿瘤13例诊治体会[A];2009年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2009年
5 吴月;德伟;张一鸣;徐桦;;葡萄糖对鼠胰腺肿瘤细胞中类胰岛素生长因子(IGF-11)基因表达的调节[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
6 杨坤兴;时开网;席鹏程;倪绍忠;;联合肠系膜上静脉/门静脉切除的胰十二指肠切除术[A];中华医学会第十一届全国胰腺外科学术研讨会论文汇编[C];2006年
7 金震东;蔡振寨;李兆申;邹多武;湛先保;陈洁;许国铭;;超声内镜检查术对胰腺肿瘤早期诊断的价值[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(上册)[C];2007年
8 牟永华;邢人伟;牟一平;聂寒秋;李敏献;梁思渊;陈明;周龙;;腹腔镜胰体尾切除术的临床应用(附1例报告)[A];2007年浙江省微创外科学术会议论文汇编[C];2007年
9 马南;韩新巍;王振豫;周志刚;管生;高雪梅;王艳丽;;CT导向下应用粗针穿刺活检诊断胰腺肿瘤[A];河南省首届肿瘤微创治疗学术会议暨河南省抗癌协会肿瘤微创治疗专业委员会成立大会论文汇编[C];2006年
10 郑茂松;许东兴;蒋羽;林杰成;;胰腺癌164例治疗临床探讨[A];中华医学会第十一届全国胰腺外科学术研讨会论文汇编[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李磊;维生素D受体基因多态性和乙型肝炎病毒与胰腺癌的相关研究[D];山东大学;2014年
2 李建;CXCL12-CXCR7轴在胰腺癌迁移侵袭中的作用及机制研究[D];北京协和医学院;2014年
3 胡珊珊;ARHI基因对胰腺癌微环境血管生成的影响及相关分子机制的研究[D];北京协和医学院;2014年
4 陆洋;MiR-200a对人胰腺癌干细胞上皮—间质转化(EMT)及体外生物学行为影响的实验研究[D];苏州大学;2014年
5 邵成浩;反义血管内皮生长因子基因转染抑制胰腺癌生长的实验研究[D];第二军医大学;2001年
6 李强;脂肪乳作为溶剂行胰腺区域性动脉灌注化疗治疗胰腺癌的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年
7 江月萍;超声内镜引导下放射性~(125)I粒子组织间植入联合化疗治疗中晚期胰腺癌:前瞻性随机对照研究[D];第二军医大学;2008年
8 方驰华;肝脏管道系统数字化及虚拟肝脏的研究[D];第一军医大学;2005年
9 张波;5-LOX/COX-2及其抑制剂在胰腺癌中的实验及临床研究[D];山东大学;2004年
10 徐彤;检测粪便中K-ras突变及胰液细胞学辅以检测抑癌蛋白表达在胰腺癌筛选和诊断中的价值[D];中国协和医科大学;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈涛;胰腺肿瘤不同术式对糖代谢影响的前瞻性研究[D];第二军医大学;2011年
2 孔德帅;胰腺肿瘤患者胰周血管三维重建及可视化仿真手术研究[D];南方医科大学;2013年
3 潘文征;与胰腺癌诊断相关血浆miRNA的研究[D];山东大学;2014年
4 赵新;应用组织芯片技术研究胰腺癌中DcR3蛋白的表达及其临床意义[D];吉林大学;2014年
5 刘佳怿;双源CT双能量扫描在胰腺肿瘤诊断中的应用价值[D];昆明医科大学;2013年
6 张鑫;Ku70在人胰腺肿瘤组织中的表达及其临床意义[D];吉林大学;2011年
7 韩玲玲;大豆胰蛋白酶抑制因子的分离纯化及对小鼠胰腺氧自由基水平的影响[D];吉林农业大学;2012年
8 曲洪生;不同剂量STi及抗氧化剂干预对小鼠胰腺氧自由基水平的影响[D];吉林农业大学;2013年
9 张敏;75例胰腺肿瘤临床病理特征及E-cad、p120在胰腺实性假乳头状肿瘤表达[D];吉林大学;2013年
10 田瑞清;建立标准化胰腺癌标本库的初步探讨及E-cadherin、DEC1在胰腺癌中的表达及临床意义[D];南方医科大学;2014年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 天津市肿瘤医院胰腺肿瘤科主任 郝继辉;从乔布斯请假说胰腺肿瘤[N];健康报;2011年
2 天宣;北京天坛医院成功切除罕见巨大胰腺肿瘤[N];大众科技报;2002年
3 李新民;射频消融治疗胰腺肿瘤获成功[N];中国医药报;2002年
4 王伦;北京肿瘤医院 用腹腔镜技术切除胰腺肿瘤[N];中国医药报;2009年
5 天津医科大学附属肿瘤医院胰腺科主任 郝继辉 整理 李运红 赵迎;怀疑胰腺肿瘤 首选B超检查[N];健康报;2010年
6 记者刘道安 通讯员红迎;糖摄入量每日超过50克成为致癌隐患[N];健康报;2010年
7 吴嗣泽;自行购药要小心[N];健康报;2003年
8 张家勇;打嗝放屁多时要防胃炎[N];四川科技报;2003年
9 程守勤;中大医院打破胰腺癌治疗禁区[N];中国医药报;2002年
10 麻凯;中医治肝病经验谈[N];安徽日报;2001年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978