收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

果蝇14-3-3ξ基因选择性剪接机制的研究

王海涛  
【摘要】:真核生物基因在转录后需要经过一系列复杂的后加工过程才能够成为具有正常生物学功能的成熟mRNA,后加工过程包括加帽、加尾、RNA编辑和选择性剪接等。而前体mRNA的选择性剪接则显著增大了蛋白质的多样性,以及基因表达的复杂程度。真核生物的内含子有一个明显的特征,就是在很多物种中其5'和3'剪切位点的基本序列都具有相对很高的保守性,内含子从mRNA前体转录产物中的去除和随后外显子的连接称作mRNA前体的剪接,它是构成真核基因表达和基因调控水平的一个重要方面。选择性剪接在真核生物蛋白质组的扩展以及新功能的产生中起着积极的作用,其多种剪接形式在功能调控水平上受到越来越多的重视,特别是通过改变生物大分子的局部结构导致的细微调控对重要功能产生的影响。 14-3-3蛋白家族的成员形成了一组分子量为30kDa的高度保守的酸性蛋白,在许多器官和组织中广泛表达。14-3-3现已被证实是一个二聚体蛋白家族,能够调控蛋白质之间的相互作用。其作用涉及细胞信号通路,细胞周期进程的调控,胞内靶向作用,细胞骨架结构和转录等方面。二聚体结构的特定组成成分可能会影响与14-3-3相互作用的蛋白,这种相互作用的调控通常包括相互作用蛋白的磷酸化作用,在一些情况下,14-3-3亚型的磷酸化作用本身可以调控蛋白相互作用。 互斥剪接是一种受到严格调控的选择性剪接方式,包括互斥基因剪接以及互斥外显子剪接,研究较多的是互斥外显子剪接,也即在一个外显子簇中最终只有其中一个外显子被保留在成熟的mRNA中,从而增加生物体的蛋白质多样性。我们发现Drosophila melangaster 14-3-3ξ基因含有互斥外显子5a、5b、5c,比较基因组学分析结果揭示了调控14-3-3ξ前体mRNA互斥剪接的内部元件:两段高度保守的选择序列以及一段锚定序列,且它们之间能形成良好的互补配对。在本研究中,我们构建了大量的突变体来探究D.melanogaster 14-3-3ξ基因的选择性剪接机制,结果表明,14-3-3毛基因嵌合外显子5b重组断裂点后面的一段序列可能对该基因的选择性剪接具有重要影响。


知网文化
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978