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十字花科植物根肿病的生物防治及其病菌的分子检测技术研究

周青  
【摘要】:十字花科蔬菜根肿病是由芸薹根肿菌(Plasmodiophora brassicae)引起的一种世界性土传病害,造成十字花科作物的大量减产,严重制约油料和蔬菜产业发展。为更好地利用生物防治的方法控制根肿病,本研究通过离体和温室筛选,得到4株具有良好防效的菌株:Y9,Y16,Y26和Z4。经菌落形态等细菌学特征观察、Biolog鉴定、脂肪酸测定(FAMEs)及16S rDNA序列分析,将该菌株鉴定为Bacillus megaterium Y9, Pseudomonas putida Y16, Staphylococcus chromogenes Y26和Microbacterium-barkeri Z4,并选择B. Megaterium Y9研制成·相关种衣剂。种衣剂检测试验表明,种衣剂干燥速度快,成膜性好,又不易溶胀,其防治效果达62%。种子包衣以后能提高种子发芽率,增强种苗长势,生防菌在种衣剂中的存活力也较强,一年后仍达3×106CFU/mL。 本研究利用超声波将壳聚糖和纳米Ti02按一定浓度比例配制成壳聚糖/纳米Ti02复合材料,增强了壳聚糖的抑菌效果,并通过促生、温室防效试验筛选出防治十字花科根肿病的最佳浓度(0.10/0.50mg/mL)。利用傅里叶红外(FT-IR)检测技术壳聚糖/纳米Ti02复合材料,结果表明壳聚糖/纳米Ti02复合材料没有改变壳聚糖的原有结构,只通过氢键使壳聚糖与纳米Ti02紧密结合。 传统方法很难准确检测根肿菌,本研究中利用FT-IR发现了感染根肿菌的植物组织所具有的特征峰。这些特征峰为利用FT-IR快速、定性鉴定植物组织是否感染芸苔根肿菌提供了依据。同时,利用Real-time PCR建立了浙江省根肿病样本定量检测方法。其扩增效率为112%,检测范围从104-108个/g。


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