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芒果过敏原分子鉴定的初步研究

谢涵冰  
【摘要】:新时代人们不断追求更高品质的生活,水果作为健康必需食品的消费量也逐年递增,但水果也是食物过敏的主要过敏来源之一。芒果(Mangifera indica L.)是世界第二大热带特产水果,但同时在水果过敏的病例中位居第一。芒果过敏成为影响农产品安全和人们生活质量的新问题。目前芒果的过敏原组分还不很明确,本研究以我国最常见的过敏水果芒果为研究对象,对芒果过敏原蛋白分子做了初步鉴定,为芒果过敏诊断、脱敏治疗和品种选育提供一定参考。主要结果如下:1.对芒果过敏进行流行病学调查,收集芒果过敏病例80例,发现中国患者芒果过敏发生途径主要为食用(80%),其次为接触(36%)。同时,根据过敏反应出现的时间不同,芒果过敏分为具有口腔过敏综合征(OAS,口咽麻痒、唇舌肿胀)、皮疹、腹痛腹泻等症状的速发型过敏(80%)和具有丘疹、水疱等皮肤症状的迟发型过敏(20%)。2.应用不同酸碱性的Coca’s提取液提取芒果蛋白,确定碱性环境提取效果更佳。提取‘台农一号’、‘红象牙’、‘贵妃芒’和‘凯特芒’四个品种芒果果皮与果肉总蛋白,发现各品种间蛋白质含量差异明显,“台农一号”芒果果肉蛋白含量最高为4.84mg/g,果皮蛋白含量约为果肉的60%。3.利用芒果过敏患者血清、小鼠血清和芒果蛋白的免疫学反应和质谱分析,鉴定出分子量在25~35KDa附近过敏原蛋白,在芒果蛋白数据库查找了这一范围芒果潜在过敏原,初步确定为一个几丁质酶家族蛋白质,为芒果未命名的过敏原。应用超滤离心法、去果胶法、离子交换层析法分离和纯化出25~35KDa的芒果潜在过敏原蛋白。4.通过大肠杆菌表达系统,成功重组芒果唯一已知完整序列的过敏原Man i 1(甘油醛3-磷酸脱氢酶),但少量芒果过敏病例的血清检测并未发现明显阳性反应。为验证Man i 1对中国患者的致敏性和下一步重组芒果潜在过敏原蛋白打下基础。


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