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2型DM动脉粥样硬化与巨细胞病毒感染及内皮素、肿瘤坏死因子的相关性研究

倪海祥  
【摘要】: 心血管病变仍是2型糖尿病(DM)最主要的致死和 致残的原因。2型DM患者冠心病发病的危险性较普通 人群高2-3倍。然而,迄今为止,糖尿病动脉粥样硬 化(Atherosclerosis,AS)的高危因素的发生、发 展的可能机制尚不清楚。自从Fabricant用禽类疱疹 病毒(Marek Disease Virus,MDV)在鸡体内成功诱 发动脉粥样硬化斑块以来,大量研究表明人类巨细胞 病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)感染与动脉 粥样硬化的形成有关。但是,HCMV与2型DM动脉粥 样硬化的形成及动脉粥样硬化形成过程密切相关的血 浆内皮素(Endothelin,ET),肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)等的关系尚未明了。我们应 用酶联免疫反应(ELISA)检测2型DM患者血清HCMV 特异IgG、IgM,放射免疫法检测血浆ET、血清TNF-α 浓度,旨在:(1)从流行病学的角度观察HCMV与2 型DM动脉粥样硬化的关系;(2)了解ET、TNF-α在 2型DM动脉粥样硬化发生、发展中的作用及HCMV感 染与ET、TNF-α的关系。 对象和方法 1.对象 1.12型DM组:68例,均为浙江省中医院门诊 和住院病人。按 WHO(1985年)标准诊断为 2型 DM, 无高血压病历史。其中男41例,女27例,年龄45f8 (平均 52.7i12.8)岁。本组 2型 州中合并动脉粥 样硬化患者21例(心绞痛13例、心肌梗塞2例、脑 血栓形成5例、下肢动脉硬化1例)。其余47例通过 临床、实验室及眼底检查,无明显的AS表现。 1.2 正常对照组:20 例均为体检健康者,其中 男性 11例,女性 9例,年龄 47-72(平均 53.SIS.2) 岁。均详细询问病史、体检及有关实验室检查,排除 心、肺、脑、肝。肾和内分泌疾病,近2 月来未服用 任何药物。二组在年龄。性别、吸烟状况。体重指数、 血压等方面无统计差别。 2.检测主 标 2.1 血清 HCMV特异 IgM、IgG抗体; 2.2 血浆 ET; 2.3 血.清 TNF-a。 3.测定试剂和方法 各组研究对象一次抽取空腹静脉血。其中3ml 分 离出血清,采用意大利SORJN BIOMEDICA 公司提供 的固相 E LIS A 诊断试齐检坝抗 11C M V-工 g M,定量检坝抗 HCMV-IgG。前者采用经典的IgM捕捉法,抗HCMV-IgG 测定采用夹心法。另取2ml 静脉血得血清,采用液相 竞争法,标记TNF-口和待测样品中的TNF-。竞争性的 与特异性抗体结合,测定样品TNF-a的浓度。另2ml 静脉血注入备有 10%乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na/ 30UI 和抑肽酶40UI 的试管中,混匀,分离血浆,用 放射免疫法测定ET。(TNF、ET 药盒由解放军总医院 东亚免疫技术研究所提供)。 -2- 4.统计学处理 采用SSPS10.O软件作统计学处理,抗mM-工洲、 HCMV-IgG阳性率比较用 x‘检验,ET和 TNF-口浓度以 X士S表示,各组间均数之间比较用t检验。各参数之 间的相关性用等级相关系数检验。 结 果 1。2型DM患者与对照组抗HCMV-IgG、抗HCMV-工gM 阳性率比较 在2 型DM患者中,抗HCMV-IgG和抗HCMV-IgM 的阳性率分别为 92.60(63/68)、45.6%(31/68);对 照组中,抗 HCMV-IgG和抗 HCMV-IgM的阳性率分别为 80.0%(16/20)、10.0%(2/20)。结果提示:2 型DM 患者HCMV感染率高于对照组,两组间抗HCMV-IgM阳 性率有统计学差异(X’=8.53,P=0.004)。但抗HCMV- IgG无统计学差异(X‘=2.69,p=0.101)。 2。2 型 州 患者有 “ 与无 “ 二亚组之间抗 HCMV-IgG、抗 HCMV-lgM* 性率比 较 在伴有AS 的2型DM患者中,抗HCMV-IgG和抗 nCMV-kM 的阳性率分别为95.2%(20/21)、57.I% (12/21):无 *S 的2 型 *M 组,抗 ****-工gG 和抗 OCMV-IgM 的阳性率分别为gi.5%(43/47)、40.4% (19/47)。同样,抗HCMV-IgM p 性率有统计学意义 (x’二2.63,n=0.045),抗 HCMV-IgG 无统计学意义 (X’=0.299,P=0.584 )。 3、2型州患者与对照组血浆盯、血清州F-a浓度 比较 在 2型 D M患者中,E Th g /n)和 T N F-a(n g/ml) 分别为68.68士17.12、1.79士O.43;对照组中,分别 为 49.04士14.36。l.32士0.41。经过 t检验,两者差 别都有高度统计学意义(t=4.66,p=0.000;t=4.31, 、3。 P=0.000)。 4、2型 DM患者有“与无“ h亚组之间 盯、TNF- a浓度比较 在伴有 AS的 2型 DM患者中(n=ZI),ET(us/ml) 和 T N F-a(n g/ml)分别为 8 6.7 7士 15.19、2.01士 0.4 5; 无AS组中(n=47),分别为60.59士10.49、1.68士0.38。 经过 t检验,两者差别都有高度统计学意义 *书.23, p=0.0001;上=3.003,p=0.003)。 5、2型DM中抗


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