口腔癌中一氧化氮合酶表达与微血管形成关系的研究

【摘要】： 一氧化氮（NO）是生物体内一种结构简单的自由基，又是极其重要的 信号分子，参与多种生理过程和包括肿瘤在内的多种病理过程。内源性NO 是由一氧化氮合酶（NOS）催化下，在左旋精氨酸转化为左旋瓜氨酸的过程 中产生。NOS有三种异构酶：神经型NOS（nNOS）、内皮型NOS（eNOS） 和诱导型NOS（iNOS）。现已证实NOS存在于多种肿瘤组织中，如肝癌、 头颈部鳞癌、乳腺癌。有文献报道在一些肿瘤中NOS表达水平与预后相关。 肿瘤组织存在微血管形成的现象，肿瘤的微血管形成是肿瘤发展的必经阶 段，与肿瘤的生长、局部浸润和远处转移相关，而血管内皮生长因子（VEGF） 被认为是最重要的血管形成促进因子。 本课题研究目的：a．研究三种NOS在口腔癌组织中的表达；b．研究 VEGF在口腔癌组织中的表达；c．计数口腔癌组织微血管密度（MVD）值， 研究口腔癌组织微血管形成；d．研究NOS表达水平和口腔癌区域淋巴转移的 关系；e．研究口腔癌NOS表达和VEGF表达、口腔癌组织做血管密度之间 的关系。 浙江大学硕士学位论文 材料与方法 1 选取临床资料完整的口腔癌病例41例作为研究对象，收集年龄、性 别、部位、病理分级、淋巴转移以及临床分期等资料；收集9例正常口腔粘 膜作研究对照。 2 采用兔疫组化SP法检测41 例口腔癌石蜡切片中三种NOS 以及 VEGF的表达；测定口腔癌组织MVD（CD34标记）；检测9例正常口腔粘 膜石蜡切片中三种NOS的表达。 3 统计分析口腔癌NOS表达水平与淋巴转移、病理分级、临床分期的 关系；分析口腔癌NOS表达水平与口腔癌组织微血管密度、VEGF表达水平 之间的夫系。 结果 1 口腔癌 eNOS阳性表达率为 48．80％。其中淋巴结阴性组（LN。）和 淋巴结阳性组（LN＋）eNOS阳性率分别为1905％、80刀0％，其差异有高度 统计学意义（X‘－1523，P－0刀00人病理分级高分化组（GI）和中低分化组 （GZ＋G3） eNOS阳性率分别为 5200％、4375％，其差异无统计学意义；临 床分期（I＋11）组和（Ill＋IV）组 eNOS阳性率分别为 25％、64％，差异有统 计学意义（X’一5939，P—0刀15）。 2，口腔癌 nNOS阳性表达率为引．20％。其中 LN－组和 LN＋组 nNOS阳 性率分别为38刀9％、65刀0％，差异无统计学意义；GI组和GZ＋G3组nNOS 阳性率分别为 52。00％、5000％，差异无统计学意义；临床分期（I＋11）组和 （if＋N）组 nNOS阳性表达率分别为 37，50％、60刀0％，差异无统计学意义。 3 口腔癌 iNOS阳性表达率为 6341％。其中 LN。组和 LN＋组 iNOS阳 性率分别为429％、8500％，其差异有高度统计学意义（X乙7840，p－0刀05人 GI组和 GZ＋G3组iNOS阳性率分别为 72刀0％、56．25％，未显示出统计学差 异；临床分期（1＋11）组和U卜W）组wOS阳性表达率分别为43乃％、 2 浙江大学硕士学位论文 76刀0％，差异有统计学意义（X‘－4374，p－0036）。 ’ 0例正常口腔粘膜上皮细胞中 ewos、nwOS和 twos表达均为阴性。 5．口腔癌 MVD均值为 39尸07士门、230。LN－组和 LN＋组 MVD均值分别 为33刀4818657、4670019二80，差异有高度统计学意义（t。4．874，P—0000）； 临床分期（I＋11）组和（m＋w）组 MVD均值分别为 34，438iii、530、 43080t9836，差异有统计学意义（＃2566，P—0刀14）。 6、日腔癌 VEGF阳性表达率为 61．000。其中 LN－组和 LN＋组VEGF阳 性率分别为 4286％、8000％，差异有统计学意义（X＊5939，p－0＊15）； 临床分期（I＋11）组和（m＋w）组 VEGF阳性率分别为 37．50％。76．00O，差 异有统计学意义（X‘－6刀77，P－0014）；VEGF阴性表达组和阳性表达组 MVD均值分别为3212518，617、44．560if0046，差异有统计学意义（t—4刀79， P—0000）。 7．eNOS阴性表达组和阳性表达组的MVD均值分别为34．524f9，704、 45150t10271，差异有高度统计学意义（t＝3．406，P—0002）；nNOS阴性表 达组和阳性表达组MVD均值分别为36 150d门二46、43095LI〕464，差异有 统计学意义（t＝2058，P—0刀46）；iNOS阴性表达组和阳性表达组 MVD均值 分别为29667L6945、45500t8．910，差异有高度统计学意义（FS、913， P—0刀00 ）o 8．eNOS阴性表达组和阳性表达组VEGF阳性表达率分别为52．38％、 70刀0％，差异无统计学意义（X 2－l．336，P－0．248）；nNOS阴性表达组和阳 性表达组VEGF阳性表达率分别为50刀0％、7143％，差异无统计学意义； iNOS阴性表达组和阳性表达组VEGF阳性表达率分别为3333％。76．92％， 差异有高度统计学意义（X‘－7596，p＝0006）。 结论 1 与正常口腔粘膜上皮细胞相比，口腔癌细胞中三种 NOS均有高表达；