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小鼠心脏移植中经冠脉系统转基因的研究

冯强  
【摘要】: 目的 随着基因工程,尤其是转基因技术的发展,将外源基因转 入移植心脏,治疗移植后的缺血-再灌注损伤和免疫排斥反应, 以减少使用免疫抑制剂,成为研究的热点。本试验试图通过将 报告基因(Lac-Z基因)转入移植心脏并表达,来证明将外源基 因转入移植心脏进行基因治疗的可行性。方法 首先建立小鼠 异位心脏移植模型,建立经冠状动脉系统灌注技术。再将12只 BAIB/C近交系小鼠随机分为转基因组和空白对照组,各6只。 转基因组经冠脉将质粒载体(PSV-β-gal)/脂质体(DOSPER) 灌注入移植心脏;对照组则灌注生理盐水。术后3天收取心脏, 冰冻切片,经X-gal组织化学染色检测Lac-Z基因的转染和表 达情况。结果 转基因组的3例都检测到Lac-Z基因的表达。 其中有两例,其Lac-Z基因表达位于心室壁中层的心肌内,呈 点状兰斑;有一例,其表达位于心外膜下的心肌内,呈片状兰 斑。而对照组则未检测到Lac-Z基因的表达。结论 以质粒表 —— 达载体旭质体的形式,经冠脉灌注方式,把外源基因转入移 植心脏是可行的。本试验为心脏移植后缺血-再灌注损伤和免 疫排斥反应的基因治疗的可行性提供了依据。


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