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寻常型银屑病中VEGF和MCP-1表达的研究

陈积愫  
【摘要】: 银屑病是一种常见的慢性炎症性疾病,以角质形成细胞 过度增生、炎症细胞浸润、新生血管形成为其组织病理改变 的三要素。新生血管生成为表皮增生提供支持,同时炎症细 胞通过高通透性的血管内皮进入病变组织,且银屑病的复发 与皮损内真皮乳头内皮细胞的过度表达亦有关。因此对银屑 病血管生成的研究有助于揭示银屑病的发病机制,并指导临 床治疗。目前有关银屑病的血管生成,特别是一些血管生成 相关因子以及应用抗血管生成药物治疗银屑病的研究正日益 受到重视。 研究发现,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和单核细胞趋化因子-1(monocyte chemoattrant protein-1,MCP-1)均具有血管生成的作用, VEGF是目前发现的作用最强、最专一的直接促血管生成因 子之一,MCP-1在体内、外实验均证实具有促进炎性血管生 成的能力。研究认为角质形成细胞能分泌VEGF及MCP-1。 由于银屑病本身是一个炎症性疾病,同时又有角质形成细胞 过度增生特性,因此检测VEGF、MCP-1在银屑病中的表达, 井结合临床资料,在血清水平及分子病理学角度综合分析它 们在银屑病中的异常表达,有助于深入了解血管生成因子、 炎症介质、炎症细胞以及增生的角质形成细胞之间的网络关 系以及促血管生成因子在银屑病发生、发展中的作用,为银 屑病的临床及基础研究积累资料。 材料与方法 血清标本:31例患者血清标本来自我科 1999年 3月至 1999年 7月住院及门诊治疗的进行期寻常型银屑病患者,其 中男性 2 3例,女性 8例。年龄 13*7 2岁,平均 44.9士 18.5岁。 28例对照血清取自正常人。其中男性20例,女性8例。年 龄17-52岁,平均39。0f8.8岁。ELISA法测定血清中VEGF、 MCP-1浓度。 病理标本:39例标本取自1999年3月至200o年IO月我 院皮肤科门诊及住院治疗的进行期寻常型银屑病患者。其中 皮损 29例,非皮损 10例。29例皮损中男性 ZI例,女性 8 例。年龄11-63岁,平均36.8土149岁,PASI评分1.6-25.5 分,平均80士6.3分。10例非皮损中男性7例,女性3例, 年龄 16-6 3岁,平均 3 8.1士 151岁,PA SI评分 3二-16 3分, 平均 6.27土4.l分。正常人皮肤组织 10例,其中男性 4例, 女性6例。年龄24-70岁,平均428士13.9岁。兔疫组织化 学法测定组织中VEGF、MCPd 的表达。主要试剂购自北京 中山公司,实验用小鼠抗人VEGF单抗、山羊抗人MCP-1 多抗均为 Santa Cruz公司产品。VEGF一抗稀释度为 1:100, MCP-1 一抗稀释度为 1:200,以 PBS缓冲液代替一抗作为 阴性对照。 3 结果判断及统计 做标准曲线测定血清中VEGF、MCP1 的浓度,用 SPSS”C统计包中非参数统计进行数据统计分析,显著性检 验水平为0.05。 显微镜下观察:VEGF、MCP-1染色均定位于细胞浆,细 胞染色根据染色深度及阳性细胞数分别计为0。3分,其中染 色深度以多数阳性细胞的呈色反应为标准,黄色为1分、棕 黄色为2分、深棕褐色为3分,在高倍镜下通过计数网格取 任意5个视野内阳性细胞所占比例,取平均百分数,VEGF和 MCP1 兔疫染色以组织中阳性细胞数 g 20%作为阳性判定标 准,分级为:阳性细胞数<20%为0分、<50%为1分、50%-80% 为2分、>80%为3分,并根据这两项指标的积分分4级,即 阴性(-)为0分、弱阳性(+)为2分、阳性(++)为3-4 分、强阳性(+++)为5。6分。结果用SPSS统计软件包,选 择X‘检验对结果进行统计分析。 结果与结论 结果显示:(l)VEGF在银屑病患者皮损中主要表达于角质 形成细胞胞浆内,在增生的表皮角质形成细胞中,VEGF表达 几乎遍布全层。真皮中上层浸润的部分炎症细胞胞浆内亦可见 到表达。血管内皮细胞可见少量表达,同时在银屑病患者非皮 损的表皮全层亦有表达。VEGF在银屑病皮损中的表达最强, 非皮损次之,正常人最弱。经统计学检验,皮损组、非皮损组 与正常人组比较均有显著性差异(P<0刀1);非皮损组与皮损 组比较,两者无显著性差异(P>o.05)。皮损角质形成细胞中 VEGF的表达与PASI评分无关,提示VEGF水平升高可能与银屑 4 4 病疾病本身相关,而与病情轻重无关,不能作为判断病情和估 计预后的指标。我们还发现银屑病组血.清中VEGF的水平较正 常人大大增加 冲<0刀1),银屑病患者血清内***F水平升高, 及皮损、非皮损中表达增强。均提示VEGF可能与其发病有关。 (2)MCP-1在银屑病患者皮损中主要表达于角质形成细胞胞 浆;在增生的表皮角质形成细胞中,MCPd表达几乎遍布全层, 但以基底层染色最强。真皮中上层浸润的部分炎症细胞胞浆内 亦可见到表达。


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