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肿瘤提取物冲击致敏树突状细胞治疗G422胶质母细胞瘤的实验研究

童鹰  
【摘要】: 目的:研究肿瘤细胞提取物体外冲击致敏的树突状细胞(DC)回输诱导体内产生 保护性免疫反应及对颅内荷瘤小鼠的免疫治疗效应,探讨以DC为基础的疫苗对脑胶质 瘤治疗的可行性。 方法:DC是体内功能最强的抗原递呈细胞,用GM-CSF加IL-4从小鼠骨髓扩增 出DC。将G422胶质母细胞瘤细胞超声波破碎后,细胞提取物体外冲击致敏DC制成 疫苗。 104只昆明种小鼠,随机分为4组,每组26只,分别进行PBS、未经致敏的DC、 G422肿瘤细胞提取物、肿瘤细胞提取物致敏的DC皮下接种,每周一次共三周,一周 后每组各取6只小鼠脾细胞进行细胞毒性T淋巴细胞(CTL)体外诱导及活性检测(定 量乳酸脱氢酶法),其余80只颅内接种G422胶质母细胞瘤(5μl/鼠,含1×10~5个细胞)。 另取80只昆明种小鼠颅内接种G422胶质母细胞瘤(5μl/鼠,含1×10~5个细胞)4 天后,随机分为4组,每组20只,分别进行PBS、未经致敏的DC、G422肿瘤细胞提 取物、肿瘤细胞提取物致敏的DC皮下接种,每周一次,共三周。 观察各组小鼠的生存时间,小鼠死亡后进行病理学检查。 平均生存时间估计及生存时间比较用Kaplan-Meier(log-rank test)法,CTL杀伤活性 浙江大学医学院硕士论文 比较用方差分析(student-NewmanKeuls法)。 结果:PBS、未经致敏的DC、G422肿瘤细胞提取物、肿瘤细胞提取物致敏的DC 组 CTL杀伤活性分别为(13.62士5.25)%、(25.19士8.99)%、(13.28土4.47)%、(40.65 士3.85)%,疫苗能诱导产生针对G422肿瘤抗原特异性CTL,差异具有非常显著性 (P<0刀1)。用*422细胞超声波破碎后细胞提取物体外冲击致敏*C制成疫苗,接种疫 苗后的小鼠能明显抵抗*422的再次攻击①<0刀5),具有免疫保护作用,P*s、未经致 敏的DC、G422肿瘤细胞提取物组生存期分别为(ZI.42士1.S6)、(24.00士2.36)、 (22.75士l.89)天,肿瘤细胞提取物致敏的DC组生存期为(32.42士3.80)天,前三 组30天内均死亡,而疫苗组30天后仍有6队0%存活:肿瘤细胞提取物致敏的*C回输 兔疫接种至荷瘤小鼠使荷瘤小鼠的生存期明显较对照组延长0<0刀5),肿瘤细胞提取物 致敏的 DC组生存期为(22.0士3.12)天,35.0%超过 25天,而 PBS、未经致敏的 DC、 G422肿瘤细胞提取物组生存期分别为(17.00士 l.62)、(17.SS士 1.80)、(16.92士 2.20)天,且均未超过 25天。 结论:肿瘤提取物体外冲击致敏DC,然后将之回输免疫接种至颅内荷瘤小鼠能显 著地诱导机体产生抗原特异性CTL,激活抗肿瘤T细胞,使荷瘤小鼠的生存期明显延 长。该实验为DC疫苗免疫治疗胶质瘤提供了实验基础及理论依据。


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