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中华猕猴桃果中水溶性多糖的分离和纯化研究

张良  
【摘要】:对中华猕猴桃鲜果中的多糖的提取和分离纯化过程进行了研究,分别对多糖提取的预处理过程、初步提取过程、粗多糖的进一步分离和纯化、所分离的不同多糖组分的简单物理化学性质进行了研究。 在中华猕猴桃鲜果的预处理中,考察了不同抽提时间对糖抽提得率的影响、不同的超声波预处理时间对糖抽提得率的影响和不同的试剂对抽提液中杂蛋白去除效果。结果表明超声波预处理2.5小时可以提高糖的抽提得率约13%,利用2M三氯乙酸(加入量为3%v/v)和2M硫酸铜(加入量为4%v/v)可以很好地去除抽提液中的杂蛋白,同时糖的损失很少。利用超滤膜对样液进行超滤浓缩可使样液被浓缩10倍,试样中的多糖可以用55%乙醇初步沉淀出来。 利用离子交换层析技术和凝胶排阻层析技术进行了粗多糖的进一步分离和纯化的研究,考察了不同的缓冲体系中,不同pH条件、不同缓冲液浓度下多糖的吸附和洗脱。发现pH8条件下有利于多糖在DEAE Sepharose FF上的吸附,硼酸盐缓冲液由于可以和多糖形成络合阴离子,提高了多糖在吸附剂上的吸附容量,利用硼酸盐缓冲液可使不同多糖组分得到部分分离。Sephades G150是比较适合于猕猴桃多糖的进一步分离的,可将多糖分成三个组分。 测定了所得到三个多糖的组分的分子量,发现其分子量较为接近,在10万附近,红外谱表明它们是多羟基化合物,分子中可能存在含氮糖残基,此外三个多糖组分中都存在d—D—葡萄吡喃糖吸收峰。多糖组分一的完全水解液纸色谱、薄板层析和气相色谱实验表明中可能含有D-葡萄糖、D-甘露糖、D-鼠李糖。


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