低温胁迫对草鱼ZC-7901细胞系和淡水白鲳CBS细胞系某些细胞功能影响的研究

【摘要】： 本文以培养的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)吻端细胞系ZC-7901和淡水白鲳(Colossoma brachypomum)吻端细胞系CBS为模型，研究低温胁迫对其细胞膜流动性、钙离子水平、ATP酶、丙二醛(MDA)含量、超氧化物阴离子(O2-')水平以及抗氧化酶系统的影响，以期探讨它们与细胞耐寒性的关系。 与对照(ZC-7901，28℃；CBS，37℃)相比，2-3℃低温胁迫6h、12h、24h、48h、72h时，草鱼ZC-7901细胞的微粘度(η)分别是对照的1.110、0.926、0.726、0.646、0.696倍；脂质流动性为0.862、1.118、1.610、1.927、1.716倍；细胞膜的流动性为0.901、1.080、1.377、1.547、1.435倍。而在8℃低温胁迫下淡水白鲳CBS细胞的微粘度(η)为对照的1.068、0.905、0.937、1.024、1.071倍；脂质流动性为0.912、1.154、1.098、0.966、0.908倍；细胞膜的流动性为0.937、1.105、1.068、0.976、0.934倍。结果提示在低温胁迫开始较短时间(6h)内，草鱼细胞和淡水白鲳细胞膜流动性均下降，草鱼细胞随着低温时间的延长，膜流动性开始增高，低温48h时，达到最高，随后又下降，但仍高于对照。而淡水白鲳细胞在低温胁迫12h时膜流动性达到最大值，随低温时间延长，膜流动性下降，在低温胁迫48h时膜流动性低于对照，低温胁迫72h时膜流动性更低。可见在低温胁迫下草鱼细胞仍能保持合适的流动性，而淡水白鲳只在较短时间内保持一定的流动性。 草鱼ZC-7901细胞在2-3℃低温胁迫6h，钙离子(Ca2+)水平即升高，低温胁迫12h时，Ca2’水平达到峰值。随着低温时间的延长，Ca2’水平开始下降，在低温48h时，Ca2+／’水平比正常时的稍高，在低温处理72h时，Ca2’水平稍低于正常水平。淡水白鲳细胞在8℃低温处理6h，Ca2’水平同样升高，低温处理至12h时，C／’水平达到峰值，低温处理24h时Ca2’水平又下降，但仍高于正常水平。但随着低温时间的延长，Ca2’水平又增加。可见草鱼细胞内的Ca2’在低温胁迫时仍能保持一种稳态平衡，而淡水白鲳在较短时间(24h)内能保持钙的稳态平衡，但随着低温时间的延长，这种平衡遭到破坏。 与对照相比，低温胁迫6h、12h、24h、48h、72h时，草鱼ZC-7901细胞的MDA含量分别为对照组的1.40、1.75、1.36、1.31、1.27倍，低温胁迫12h时，MDA含量达到最高；其O2—水平在低温胁迫6h时达到最高，然后逐渐下降，但 惭 仁 人 沓 林十含 伍《大 仍稍高于对照组。淡水白鸥CBS细胞内MDA含量分别是对照的l．06d．14、l．22。 1．26、1．25倍；其 0。水平低温胁迫 6h时达最高，12h时下降，但随低温胁迫时 间的延长，其水平又逐渐升高并高出对照组较多。 在同样条件处理下，草鱼ZC－7901细胞的ATP酶活力分别为对照组的0．522。 0．896、豆．246、3．716、12．455． 10．873倍，力入放线菌素 D（终浓度 0．lpg／ml） 与瞟吟霉素（终浓度 lpg／ml）后再低温胁迫 48h，对 ATP酶活力的抑制率分别为 50．8％和64．3％：CBS细胞ATP酶活力分别为对照的0．710、0．567、0．805、0．832、 0899、0．808倍。ZC－7901细胞SOD酶活力为对照的0．892、1．5、l二5、1．26、 1．22倍；CAT酶活力为 0．913、2．27、6．73、1．78、1．13倍；POD活力为 0．8093、 0．9048、1．5、l刀05、l刀04倍；GSH－PX酶活力为0．604、1．3、l刀8、l刀7、0．987 倍。SOD及 GSH－PX酶活力在低温胁迫 12h时达到最大值；而 CAT和 POD酶活 力在低温胁迫24h时达到最大值。所有这4种酶在低温胁迫6h时酶活力均降至 最低。