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三种氧自同基诱导DNA超弱发光机理的初步研究

苏清锋  
【摘要】: 本论文以小牛胸腺DNA和质粒pBs为实验材料,利用光子图像探测系统(Photon-counting image acquistion,PIAS)、微弱发光测量仪和UV/VIS分光光度计和生物统计学的成组比较法原理对单线态氧(~1O_2)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O_2~-)三种氧自由基诱导DNA超弱发光的变化过程进行了研究,结果发现这三种氧自由基中·OH能诱导DNA的超弱发光发生显著的增强变化,而其他两种氧自由基对DNA的超弱发光并无显著诱导作用。同时,用·OH对几种不同浓度的DNA溶液进行诱导,发现这几种DNA溶液的超弱发光具有相近的显著增强系数,这说明DNA溶液的浓度变化并不影响·OH对DNA本身超弱发光的诱导作用。本实验还利用Lambda Bio 40 UV/VIS分光光度计对三种氧自由基诱导DNA超弱发光过程进行了280nm处的紫外吸收研究,发现在这个过程中反应体系的A_(280)值并没有变化,由此可以认为在诱导过程中DNA并没有发生降解或者其降解非常微弱。三种氧自由基与DNA溶液反应后的电泳图谱也表明DNA在这个过程中确实没有发生降解。这就说明了三种氧自由基对DNA超弱发光的诱导作用可能只是通过改变了DNA的构象,而不是使DNA发生降解来实现的。


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