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大熊猫和朱鹮胶质细胞源神经营养因子(GDNF)的克隆及表达研究

郑桦锐  
【摘要】: 胶质细胞源神经营养因子(glial cell line-derivedneurotrophic factor,GDNF)是Lin等人于1993年从B49胶质细胞系中首次分离并纯化得到的。研究结果表明,GDNF对于神经系统具有很强的保护及恢复作用,对视网膜变性的感光细胞具有挽救作用。此外,GDNF在外周组织如肾脏的发育和精子的发生等方面,具有显著的调节功能。 本项研究经PCR引物设计后,以大熊猫和朱鹮的基因组DNA为模板,克隆了大熊猫和朱鹮的GDNF成熟蛋白基因。序列比较表明,大熊猫和朱鹮的GDNF基因与人、猕猴、大鼠、小鼠及鸡的GDNF具有非常高的同源性,分别为86.8%和75.4%、86.8%和76.6%、82.3%和68.7%、83.1%和67.9%,70.1%和94.3%。将大熊猫和朱鹮的GDNF基因片段分别克隆至pGEX—4T—3表达载体,并经IPTG诱导,表达出了预期大小的蛋白,该蛋白用Glutathione Sepharose 4BMicroSpin Column进行了纯化。


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