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芍药甙的抗血栓与内皮细胞保护作用及其机理研究

叶剑锋  
【摘要】: 作为赤芍与白芍中共同含有的有效成分,芍药甙的药理作用越来越受到重视。国内外的研究表明,芍药甙具有明显的的抗炎、改善学习记忆、降血糖、镇静、抗惊厥、解痉等作用。但在芍药甙在抗血栓和内皮保护方面的作用及相关机理还未见有关报道。本研究中利用活体血栓模型,评价了芍药甙的抗血栓作用,并且通过体外培养的血管内皮细胞,从内皮细胞的花生四烯酸代谢、分泌因子、细胞代谢活性以及细胞粘附着手,对芍药甙的抗血栓作用及内皮细胞保护作用机理进行了深入研究。 在大鼠光色素法活体血栓形成模型中,芍药甙可以延长血栓形成时间和速度,表现了显著的抗血栓作用。这种作用是剂量相关性的。进一步研究表明芍药甙可以增加体外培养的脐静脉血管内皮细胞分泌t-PA,抑制内皮细胞合成的前列环素和血小板生成血栓烷A_2,但对内皮细胞分泌wWF及PAI活性没有影响,这说明芍药甙可以抑制花生四烯酸代谢。 通过测定内皮细胞的代谢活性及培养液中的LDH,证明了芍药甙可以剂量依赖性地抑制光色素反应引起及过氧化氢引起的内皮细胞损伤。应用流式细胞仪技术检测细胞的坏死率,结果显示芍药甙可以显著抑制过氧化氢诱导的内皮细胞坏死。同时利用共聚激光共聚焦显微技术结合特异性细胞内荧光标记等实验技术,研究了芍药甙对过氧化氢引起的内皮细胞内钙超载的抑制作用,实验结果表明芍药甙可以部分抑制细胞内游离钙离子的浓度。并且芍药甙还可剂量依赖性地抑制缓激肽引起的内皮细胞NO生成和胞内钙离子的增加。这表明芍药甙的内皮细胞保护作用与抑制过氧化氢引起的胞内钙超载相关。 浙江大学博士论文 在静态粘附模型中,PF可以抑制LPS诱导的内皮细胞和HL-60的粘附,进 一步应用流式细胞术研究表明PF可以抑制在LPS诱导的内皮细胞ICAM-l 及 E《ELECTIN表达升高,这种抑制作用与剂量成正相关的关系。本研究在流式细 胞仪上建立了检测全血的血小板与白细胞的粘附模型,研究表明在ADP诱导下, 全血的血小板与白细胞的粘附增加,而芍药贰也可以抑制这两种细胞间的粘附。 在以上研究结果的基础上,本研究得出如下结论(1)芍药贰可以抑制花生 四烯酸代谢,其作用位点之一为环氧化酶,TXAZ合成酶也可能是芍药贰的作用 位点。(2)芍药贰具有抗氧化作用及抗氧自由基作用,使其对光色素反应损伤与 过氧化氢损伤具有保护作用。这种作用与其抑制胞内钙超载相关,同时也可能是 由于芍药贰分子本身具有的清除自由基的作用相关。(3)芍药贰可以抑制内皮细 胞与白细胞及血小板与白细胞的粘附,这可能也是芍药贰抗血栓作用及抗炎作用 的一个途径。虽然芍药贰的这种抑制作用的机理还不明确,推测这可能与其抑制 白三烯的合成与抑制胞内钙离于浓度升高相关。


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