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芦荟组培快繁技术及其遗传资源的RAPD分析

吴江林  
【摘要】: 芦荟系百合科芦荟属多年生肉质常绿草本植物,原产非洲东南部及地中海沿岸一带,我国的南、北方均有种植,是一种很有开发前途的经济植物资源。尤其美国库拉索芦荟除药用外,在观赏、食品保健、美容化妆方面均有重要开发应用价值。本研究开展了芦荟组培快繁技术及其遗传资源的RAPD分析。 一、芦荟遗传资源的RAPD分析 本实验提取了纯度较高的芦荟基因组DNA,电泳结果见到一条比较亮的条带。对RAPD反应体系进行了优化,通过对模板DNA浓度、dNTPs浓度、MgCl_2浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度逐个进行梯度实验,获得适合芦荟材料的RAPD反应参数。 本研究采用随机扩增多态性(RAPD)标记,探讨了13芦荟品种的遗传背景和多态性。对206个随机引物中对13个芦荟品种的DNA样品进行筛选结果表明,共获得了16个有稳定多态且带型清晰扩增带的引物,可用于芦荟的遗传变异多态性鉴定。35个引物共扩增出173条谱带,其中78条谱带具有多态性,每个引物可扩增出1~9条多态性谱带,平均4.94条。 二、芦荟组织培养快速繁殖 本实验以芦荟叶片和分蘖原基诱导不定芽、根的方法,建立了较完善的芦荟组织培养快速繁殖实验体系。通过对比较了2种培养基(MS培养基、N6培养基、各种浓度梯度的生长素NAA和分裂素6-BA,3个温度(20、25、30±2℃不同培养温度、3种光照条对芦荟不定芽快繁系数的影响,确立了芦荟组织培养快速繁殖的参数。并在实际应用中发挥了较大的作用,显示了良好的前景。


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