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中药杭白菊心血管系统作用及活性成分研究

蒋惠娣  
【摘要】: 杭白菊[Dendranthema morifolium(Ramat.)Tzvel.]为“浙八味”之一,是卫生部首批批准的药食同源的道地药材,也是我国四大药用名菊之一,与滁菊、亳菊、怀菊一起被收载于《中国药典》2000版。早期的研究表明,杭白菊水提醇沉淀制成的浸膏可以增加实验动物的冠脉流量(CF),且其对CF的增加远大于同剂量丹参;杭白菊浸膏还可以显著增加动脉粥样硬化家兔离体心脏的CF;显著减轻由于电刺激脑中枢引起的缺血性心电图ST段压低的作用。临床研究表明,杭白菊制剂对心绞痛的总有效率达83.0%,能改善冠心病患者的心电图异常,减轻慢性冠脉供血不足。但是由于实验技术和手段的限制,早期的研究已经不能适应中药现代化的需要。主要包括:没有明确杭白菊心血管作用的活性部位及活性成分;没有探讨其作用机制;仅局限于观察心脏冠脉流量的变化,对心肌收缩力的影响局限于定性描述,而没有量化指标;没有考察其对血管的作用及机制;对于口服杭白菊提取物没有探讨其体内可能的效应成分。 基于上述原因,本研究采用现代实验技术,从不同层次明确杭白菊的心血管作用;确定杭白菊心血管作用的活性部位及可能的有效成分;探讨口服杭白菊后在生物体内的主要存在形式;杭白菊提取物及体内生物转化的主要产物对血管的作用及可能的作用机制;探讨杭白菊中主要的黄酮苷及生物转化产物的同类化合物——黄酮类化合物舒血管作用与抗氧化作用的结构活性关系,为寻找和设计新型黄酮类舒血管药物及抗氧化药物提供参考。 1. 杭白菊总提取物的心血管效应观察 目的:明确杭白菊对心血管系统的作用,为进一步研究奠定基础。 浙江大学博士学位论文 方法:用Langendorff灌流技术观察杭白菊总提取物对离体大鼠心脏cF及左室发展压 (LVDP)、心率(HR)、最大收缩/舒张速率(士dP沮tmax)的影响;以结扎离体大鼠心脏冠 状动脉左前降支造成心肌缺血,观察杭白菊对缺血心脏CF及心肌力学指标的影响以及心肌 抗氧化酶(SOD)活力、脂质过氧化产物MDA的影响。利用酶解分离大鼠心室肌细胞, 以视频计算机系统测定单个心室肌细胞收缩参数,包括最大收缩幅度(dL)、最大收缩速度 (+d L/dtmax)、最大舒张速度(一dL/dtmax)和舒张末心肌细胞长度(LO)。利用细胞内 双波长钙荧光系统检测杭白菊对化学缺氧/复氧时细胞内游离钙离子浓度影响。以大鼠胸主 动脉环离体灌流法观察杭白菊对血管张力的影响。 结果:(l)杭白菊(0.25叭,0.5叭,1 .09几)浓度依赖性地增加离体大鼠心脏的冠 脉流量,增加左室发展压、最大收缩/舒张速率、左室发展压与心率乘积。(2)杭白菊 (0 .5叭)可明显减轻缺血再灌注引起的离体灌流心脏冠脉流量、左室发展压、最大收 缩/舒张速率、左室发展压与心率乘积的抑制作用。(3)杭白菊(0.5叭)可明显减弱缺 氧/复氧抑制心室肌细胞收缩幅度、最大收缩/舒张速度和细胞钙瞬态的作用。(4)杭白菊可 以显著抑制缺血再灌注引起的心肌SOD的降低和MDA的升高。(5)杭白菊浓度依赖性地 舒张PE及KCI引起的血管收缩。 结论:杭白菊可能通过对抗自由基,维持细胞内钙的平衡,从而减轻缺血再灌注和缺 氧/复氧对心肌收缩功能的抑制。 2.杭白菊不同溶剂萃取物对大鼠离体心脏和血管的作用 目的:确定杭白菊对心血管系统作用的活性部位。 方法:以不同极性的有机溶剂(石油醚、氯仿、乙酸乙醋、正丁一醇)萃取杭白菊总提 取物,减压下挥去溶剂。应用Langendorff离体心脏灌流技术比较杭白菊不同溶剂萃取物及 萃取后残留的水溶性成分对离体心脏冠脉流量、左室发展压(LVDP)、心率(HR)、最大 收缩/舒张速率(士dP/dtmax)的影响;应用离体动脉环技术,测定杭白菊不同溶剂萃取物、 萃取后的水溶性部分以及树脂纯化产物对苯肾上腺素引发的血管收缩的影响。 结果:(l)杭白菊不同溶剂萃取物对离体心脏冠脉流量、心肌收缩力均有不同程度的 增加作用,以石油醚萃取物的作用最强,乙酸乙醋萃取部分次之,氯仿萃取物及正一J一醇萃 浙江大学博士学位论文 取物的作用相近,而水溶性部分不仅作用程度最小,而且作用维持时间短暂,乙酸乙醋和 石油醚萃取物,持续时间较长。(2)杭白菊不同溶剂萃取物对PE诱发的离体大鼠主动脉收 缩均有显著的舒张作用,其作用强度以乙酸乙醋萃取物为最大,该部分的舒血管作用显著 大于相同浓度的银杏汗卜提取物(GBE)。杭白菊水溶性部分舒血管活性最弱。以树脂法纯化 得到的产物,其血管舒张作用与总提取物无明显差异。 结论:杭白菊脂溶性部分对心血管系统有较强的作用。 3.杭白菊提取物的生物转化 目的:初步探讨口服杭白菊提取物后在生物体内的转化。 方法:以木犀草素一7一O一p一D一葡萄糖昔、芹菜素一7一O一p一D一葡萄糖营、木犀草素及芹菜素 为对照,采用反相高效液相色谱法(RP一HPLC),分析家兔口服杭白菊提取物后,血.浆中是 否存在上述成分。 结果:家兔给予杭白菊提取物(100m眺g)后血浆中未检测到木犀草素一7一O一p一D一葡萄 糖昔和芹菜素一7一O一p一D一葡萄糖营,但可检测到木犀草素及芹菜素。 结论:杭白菊


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