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一种新型凋亡相关蛋白EAPF的克隆及功能研究

李长菲  
【摘要】:机体通过细胞凋亡机制选择性地清除体内无用的细胞,以维持细胞增殖和细胞死亡之间的精密平衡。因此,细胞凋亡在个体的生长发育以及存活过程中起着重要作用。细胞器内质网(endoplasmic reticulum,ER)主要参与蛋白的合成、折叠以及转运过程,并调节细胞应激反应和细胞内钙离子水平。近年来的研究表明内质网与线粒体、溶酶体相似,是参与细胞凋亡的重要细胞器之一。内质网主要通过两种机制参与细胞凋亡,即未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)和Ca~(2+)信号。内质网中的Ca~(2+)稳态改变和未折叠蛋白的积累均可诱导内质网应激反应,最终可导致细胞凋亡的发生。本研究从人骨髓基质细胞cDNA文库中自主分离了一种新型凋亡相关分子,该分子稳定表达可增加L929细胞对TNF-α诱导凋亡作用的敏感性。我们结合实验结果推测其参与细胞凋亡的可能机制为:该分子向内质网发生部分转位,从而可能诱发内质网的凋亡改变,随后内质网可能直接或间接地引起下游线粒体改变包括线粒体电势差(mitochondrial membrane potential,△Ψm)的下降和凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIE)的释放,最终导致caspase非依赖的细胞凋亡。结合该分子含有PH和FYVE功能域的结构特征,将其命名为含有PH结构域和FYVE结构域的、与内质网有关的凋亡相关蛋白即EAPF ((?)ndoplasmic reticulum-associated (?)poptosis-involved protein containing (?)H and (?)YVE domains)。


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