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1.利用噬菌体展示技术筛选Gal-α1,3-Gal结构的模拟肽 2.芋螺毒素M ⅦA的融合表达、纯化及其鉴定

夏铮  
【摘要】:随着器官移植范围的扩大,器官紧缺问题日益紧迫。为了解决这一问题,异种器官的移植成为器官移植研究新的热点。在各种异种供体中,猪凭着自身器官形体、基因组成等特点成为许多研究者的首选。但是由于猪器官表面异种抗原Gal-α1,3-Gal能和人血清中的天然抗体发生结合,引发超急性排斥反应,随后激活补体的瀑布效应,导致内皮细胞死亡,使得异种器官难以在人体内存活。体内和体外的实验表明阻断人血清的天然抗体与猪器官表面抗原Gal-α1,3-Gal结合就可以防止超急性排斥反应,因此阻断人天然抗体与猪器官表面抗原Gal-α1,3-Gal结合便成为猪器官异种移植的关键。 西非单叶豆凝集素(BS-I-B4)能结合α-1,3半乳糖(Gal-α1,3-Gal),因而可以用此凝集素模拟人天然抗体来进行α-1,3半乳糖(Gal-α1,3-Gal)模拟物的筛选。通过对西非单叶豆凝集素(BS-I-B4)在XCX15噬菌体随机文库中进行生物淘金筛选后,我们得到了序列为NCVSPYWCEPLAPSARA的小肽。经验证该小肽有竞争蜜二糖(具有Gal-α1,3-Gal结构?还是Gal-α1,6-Gal?)与凝集素BS-I-B4、A型人血清结合的能力,并可以用来抑制猪红细胞与凝集素BS-I-B4、抗B型血单克隆抗体及人的A型血血清(含人抗αGal的天然抗体)的凝集;证明该小肽可以模拟Gal-α1,3-Gal的结构,可以阻止人血清和猪器官发生的超急性排斥反应。


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