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单克隆抗体ZUC3免疫磁珠分选人骨髓间充质干细胞的方法研究

黄黎  
【摘要】:骨髓间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)是骨髓组织中除造血干细胞外的一种非造血组织的成体干细胞。MSCs具有自我更新、高度增殖及多向分化的能力,在一定的体内或体外诱导条件下可以分化为各个胚层的细胞,如脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、肌腱细胞、肌肉细胞、神经元细胞、上皮细胞等。由于MSCs具有多向分化能力并易于在体外培养、扩增,且MSCs免疫原性弱、不表达MHC-Ⅱ类分子和T细胞共刺激分子,使异基因MSCs的应用成为可能,而使之成为细胞治疗和组织工程的研究热点。但正常人骨髓中MSCs含量极低,约10~4~10~5个单个核细胞中含有一个MSC,为得到足够数量MSCs应用于临床,需建立高效的体外纯化、培养和扩增体系。通过传统的贴壁培养的方法获得的原代人骨髓MSCs耗时长、细胞的异质性大,这使MSCs的基础研究及临床应用的推广受到限制。以细胞表面特异性表型为标记,通过免疫分选的方法,可以有效地富集骨髓中含量极少的MSCs,提高原代培养所得的MSCs纯度,以推动MSCs的应用研究。目前人骨髓MSCs公认的表型特征:CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166呈阳性,不表达造血干细胞的标志性抗原,CD14、CD34、CD45、HLA-DR、血型糖蛋白A(GlycophorinA)及T或B淋巴细胞的表面标记均为阴性。迄今为止,人们对MSCs


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