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大蒜及人参提取物对心血管疾病抑制作用研究及非编码RNA与心血管疾病关系初探

柴惠  
【摘要】: 本论文对①大蒜及人参提取物对心血管疾病的抑制作用及②非编码RNA与心血管疾病的关系进行了研究。 心血管系统疾病是世界各国发病率和致死率最高的疾病之一,对其致病机理和治疗方法的探讨是研究的重点,用天然植物提取物对该疾病进行预防和治疗是该领域的研究热点。大蒜和人参一直是亚洲各国用于治疗疾病和保持健康的植物,其提取物蒜氨酸(SACS)和人参皂甙(Rbl)有很强的抗氧化活性,具有清除羟自由基功能。本论文研究的SACS和Rbl对肿瘤坏死因子TNF-α介导的炎症和心血管疾病的控制作用至今尚无文献报道。 研究结果: ①SACS和Rbl预处理HUVEC细胞可显著减少TNF-α引起的血管细胞粘附分子VCAM-1中mRNA和蛋白表达量的增高。 ②SACS和Rbl有效减少单核细胞与HUVEC细胞的粘附性。 ③SACS和Rbl减弱TNF-α引起的HUVEC细胞超氧阴离子产物的增加。 ④SACS和Rbl抑制TNF-α引起的HUVEC细胞线粒体膜电位的衰减。 ⑤SACS阻止TNF-α引起的HUVEC细胞NADH氧化酶亚基NOX4上调。 ⑥SACS和Rbl抑制HUVEC细胞中被TNF-α激活的JNK、EKR1/2和IκBα的活性。 由此可见,SACS和Rbl对TNF-α介导的炎症和心血管疾病有控制作用。该部分研究的创新点是运用前沿的现代化实验仪器和先进的实验手段,研究东方传统的保健植物对心血管疾病的影响,并取得了较为理想的结果。 非编码RNA是近年来的研究热点之一,本研究对非编码基因NRON进行过表达和干扰后,使NFAT基因被抑制或者激活,探讨其是否能影响血管内皮细胞的基本特性和功能,从而判断NRON基因是否与心血管疾病相关。 研究结果: ①非放射性细胞增殖分析(MTS): a.用不同FBS血清浓度处理相同的时间,不同稳定性的细胞系均与细胞生长呈正相关。与正常HUVEC细胞和空载体细胞相比,过表达细胞系抑制细胞增殖,shRNA干扰细胞系促进细胞增殖。 b.用相同浓度的VEGF处理不同的时间,不同稳定性的细胞系均与细胞生长呈正相关。与正常HUVEC细胞和空载体细胞相比,过表达细胞系抑制细胞增殖,shRNA干扰细胞系促进细胞增殖。 c.相同反应时间,不同VEGF浓度时,不同稳定细胞系均与细胞生长呈正相关。与正常HUVEC细胞和空载体细胞相比,过表达细胞系抑制细胞增殖,shRNA干扰细胞系促进细胞增殖。 ②细胞成管实验(Tube Formation):过表达细胞系显著抑制细胞成管能力,shRNA干扰细胞系促进细胞成管能力。 ③细胞迁移实验(Migration):过表达细胞系使细胞的迁移率明显降低,shRNA干扰细胞系使细胞的迁移率明显升高。 本研究证实了NFAT基因在被NRON基因抑制或者激活后,能显著影响血管内皮细胞的基本特性。该部分研究的创新点为,将目前较新的非编码RNA分析方法用于心血管疾病的研究,证实并开拓了NRON基因的功能。


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