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鸦胆子油对血小板活化的保护作用及其机理研究

费鲜明  
【摘要】: 目的:鸦胆子油存在于鸦胆子果实内,其主要活性成分是油酸和亚油酸,是一类具有抗肿瘤活性的化合物。鸦胆子油乳在临床被广泛应用于多种恶性肿瘤的辅助治疗;鸦胆子油乳的应用可以激活凝血系统,有活化血小板及促进血栓形成的作用;鸦胆子油也能降低血脂水平,显著增加局部内源性前列腺素E_2(PGE_2)水平,有间接抑制或增强血小板活化及血栓形成作用,因此鸦胆子油能抑制还是促进血小板活化以及作用的机制尚有待于探讨。而血小板膜上存在众多活化受体,与相应配体结合后,通过信号-反应藕联引起血小板活化、聚集以及释放反应。本研究通过人洗涤血小板模型,比较分析鸦胆子油对不同致聚剂诱导的血小板活化反应的影响,观察鸦胆子油对血小板活化的抑制作用,并探讨其可能机制。 材料与方法:25-35岁健康献血员,10天内未服用任何影响血小板的药物,分为三组:丙酮对照组(0%鸦胆子油,g/g,A0),低剂量组(9%鸦胆子油,A1),高剂量组(22.5%鸦胆子油,A2)。采集肘静脉血,ACD抗凝(全血9:1,v/v),离心制成4.5×10~8/ml洗涤血小板悬液。以比浊法检测肾上腺素、二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)、胶原及凝血酶诱导的血小板最大聚集率,计算鸦胆子油对血小板聚集的抑制率,并观察血小板聚集水平与鸦胆子油浓度的剂量依赖关系;以流式细胞术检测鸦胆子油对5种致聚剂活化的血小板膜P-选择素(CD62p)及纤维蛋白原受体(FIB-R,CD41/CD61)表达的影响,计算对FIB-R表达的抑制率;以SDS-PAGE法观察鸦胆子油对凝血酶和ADP活化的血小板骨架系统肌动蛋白聚合体的影响。 结果和结论:研究发现(1)A1和A2组5种致聚剂诱导的血小板最大聚集率明显低于A0组,A2组血小板最大聚集率明显低于A1组;A2组对血小板聚集的抑制作用显著高于A1组;(2)5种致聚剂诱导的血小板最大聚集水平与鸦胆子油浓度呈显著负相关,鸦胆子油浓度越高,对血小板聚集水平抑制程度越大;(3)A1和A2组对血小板肌动蛋白变化及CD62p表达的影响与A0组无明显差别;(4)A1和A2组都能显著降低FIB-R表达水平,A2组显著抑制FIB-R表达,FIB-R水平的变化与鸦胆子油对血小板最大聚集水平的影响一致。由此得出以下 结论: (1)鸦胆子油对各种致聚剂诱导的血小板聚集有抑制作用,这种抑制作用具有剂量依赖性。 (2)鸦胆子油对活化血小板肌动蛋白的改变没有影响,对活化血小板的收缩反应没有影响。 (3)鸦胆子油对活化血小板的释放反应没有抑制作用。 (4)鸦胆子油抑制活化血小板膜纤维蛋白原受体的表达,从而剂量依赖性地抑制血小板聚集反应。 (5)鸦胆子油对血小板活化具有抑制作用,有抗血栓的功效。


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