收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

农药残留检测的荧光和化学发光免疫分析方法研究

金茂俊  
【摘要】: 在课题组现有ELISA分析方法的研究基础上,进一步深化研究方法的相关影响因素,如基质效应、漂移现象及不同ELISA分析方法等。在ELISA三种包被模式研究中,结果显示包被抗体法和包被二抗法在分析方法的方法灵敏度和数据平行性方面较包被抗原法更有优势。为建立具更高灵敏度且可商品化开发的免疫分析方法,本文对时间分辨荧光分析方法(TRFIA)和化学发光酶免疫分析方法(CLEIA)进行了系统的研究。 通过对TRFIA分析方法荧光增强液中螯合剂β-NTA浓度、TOPO浓度及pH值等条件的筛选,得到了对于Eu~(3+)和Sm~(3+)这两种稀土离子具有良好性能的荧光增强液。在此基础上,通过对包被温度和时间、包被缓冲液、封闭物质、反应缓冲液等条件的优化。在优化基础上,建立了克百威的TRFIA分析方法并进行了标样添加回收率。结果表明,所建立的克百威TRFIA分析方法的检测灵敏度为1.86 ng/mL,样品添加回收率试验表明建立的克百威TRFIA分析方法可用于样品中克百威残留检测。 通过对CLEIA化学发光增敏液中缓冲体系、发光增强剂、鲁米诺浓度及氧化剂浓度的筛选,得到具有良好性能的发光增敏液。在此基础上,通过对化学发光板、包被温度和时间、包被缓冲液、反应缓冲液及有机溶剂与浓度等条件的优化,结果显示:Costar白色发光板的吸附效果较佳,克百威抗体选择用0.1M,pH7.2Tris-HCl液作为包被缓冲液并在并在37℃包被两小时效果为佳,封闭物质选用1%胰蛋白胨(Tyrtone)且反应缓冲液选择0.05 M,pH7.2Tris-HCl液可得到最好的反应灵敏度和最大发光计数,有机溶剂中甲醇对CLEIA影响最小,反应体系中最终含量2.5%为佳。在此基础上,建立了克百威的CLEIA分析方法,其检测限(IC_(10))为0.362 ng/mL,检测灵敏度(IC_(50))为4.244 ng/mL,并通过LC-MS/MS数据确证。结果表明克百威CLEIA分析方法在灵敏度方面明显优于ELISA分析方法,并在样品检测中得到很好的应用,对多种样品的检测限已达到相关国家及CAC等设定的克百威MRL值。 在构建成功化学发光免疫分析系统基础上,进一步将CLEIA分析方法应用到三唑磷、毒死蜱和对硫磷三种有机磷农药残留分析技术中,建立的三唑磷、毒死蜱和对硫磷三种有机磷农药的CLEIA分析方法IC_(50)值分别为0.852、21.01和2.247 ng/mL,IC_(10)值分别为0.063、0.694和0.203 ng/mL。并分别与三种农药的ELISA分析方法的检测灵敏度和检测限进行比较,结果显示,CLEIA分析方法的检测限均有了较大的提高,特别是三唑磷的CLEIA分析方法,相比于ELISA分析方法其检测灵敏度和检测限提高了2个数量级,显示出CLEIA分析方法在农药残留检测方面应用的良好前景。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 ;专家呼吁——全面建立农药残留检测体系[J];植物医生;2006年01期
2 陈宗懋;;食品中农药残留检测发展的新趋势[J];农产品质量与安全;2010年01期
3 李卫霞;;乙酰胆碱酯酶法在农药残留检测中的应用及质量控制[J];湖南农业科学;2010年03期
4 刘刚;;检测新技术:9分钟可知蔬菜农药残留[J];农业知识;2006年34期
5 ;农药管理[J];农药市场信息;2007年21期
6 徐暄;;蔬菜中农药残留检测技术研究进展[J];贵州农业科学;2009年01期
7 姜书辉;;浅谈农药残留检测技术[J];黑龙江科技信息;2009年01期
8 王存孝;;气相色谱法检测农药残留中预处理技术的进展[J];科技信息;2009年27期
9 苟金萍,张艳,程淑华,王晓菁;枸杞中农药多残留检测方法的研究[J];宁夏农林科技;2005年05期
10 李卫霞;王素娟;;ELISA在农药残留检测中的应用与质量控制[J];贵州农业科学;2009年08期
11 刘宇宏;黄科林;吴睿;慕朝师;林润国;韦毅;王桂英;李卫国;黄尚顺;;农药残留检测前处理技术研究进展[J];企业科技与发展;2009年22期
12 郑婷婷;石怀超;刘振田;公强;;基质固相分散技术在蔬菜多种农药残留检测中的应用研究[J];中国果菜;2010年12期
13 范鹏志;;试论农药残留检测的前处理技术[J];湖南农机;2011年03期
14 刘汗青;;色谱分析技术在农药残留检测中的应用[J];企业导报;2011年05期
15 张君;;溶剂强度对农药残留回收率的影响[J];安徽农业科学;2008年08期
16 王睿垠;白士刚;金长江;;激光拉曼光谱分析技术及其在农药残留检测中的试验研究[J];河北农业科学;2008年07期
17 王洁莲;张子伦;;果蔬中农药残留速测技术的应用与发展[J];山西农业科学;2010年01期
18 王桂花;;三省级农药鉴定所通过认证[J];农药市场信息;2002年04期
19 高联义;泰州市试点市场蔬菜农药残留检测的实践与思考[J];植保技术与推广;2003年06期
20 阿辉;;我国亟待建立统一的农药检测体系[J];农药市场信息;2005年24期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈红平;刘新;;色谱—质谱在茶叶农药残留检测中的应用[A];农产品质量安全与现代农业发展专家论坛论文集[C];2011年
2 赵滨尔;刘丽梅;;绿色食品农药残留检测技术研究[A];绿色食品开发与市场营销发展战略研究——黑龙江省绿色食品开发与市场营销战略研讨会论文集[C];2002年
3 陈菁菁;彭彦昆;李永玉;王伟;吴建虎;单佳佳;;基于高光谱荧光技术的叶菜农药残留检测研究[A];中国农业工程学会电气信息与自动化专业委员会、中国电机工程学会农村电气化分会科技与教育专委会2010年学术年会论文摘要[C];2010年
4 王全德;楚桂芬;陈战锋;;果菜农药残留检测及减少残留的措施[A];全国安全用药技术研讨会论文集[C];2001年
5 ;农产品质量安全控制与农药残留检测技术[A];全国农产品质量控制与溯源技术交流研讨会论文集[C];2010年
6 黄怡林;江腾辉;;广东省农药残留污染的现状和治理措施[A];全国安全用药技术研讨会论文集[C];2001年
7 赵肖磊;郑艺华;王芳芳;华泽钊;;测定农药残留量的流动式量热系统初步实验研究[A];上海市制冷学会二○○三年学术年会论文集[C];2003年
8 索世虎;郭建平;闫克峰;段爱琴;王东;张建军;;豫西苹果园无公害农药筛选及其推广应用[A];全国安全用药技术研讨会论文集[C];2001年
9 张浩;陈书焕;杨娜;郑雪峰;;邓州市无公害蔬菜产业化生产技术[A];河南省植保学会第九次、河南省昆虫学会第八次、河南省植病学会第三次会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2009年
10 孟宇航;张慧青;;蔬菜有机磷农药多残留分析前处理方法及基质效应的探讨[A];2010广东省预防医学会学术年会资料汇编[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 刘倩;石墨烯基电化学传感平台的构建及其农药残留检测应用研究[D];江苏大学;2014年
2 黄君冉;用于农药残留检测的压电免疫生物传感器的研究[D];浙江大学;2010年
3 蒋雪松;用于有机磷农药残留检测的免疫生物传感器的研究[D];浙江大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 胡建敢;基于光谱吸收技术的农药残留检测系统[D];重庆理工大学;2012年
2 赵鹏林;流动注射型酶传感器测定蔬菜中西维因农残的方法研究[D];重庆大学;2007年
3 王帅;罗非鱼及水体中拟除虫菊酯类农药残留量的测定[D];中南林业科技大学;2013年
4 靳美会;基于金纳米棒的农药残留检测技术研究[D];长春理工大学;2013年
5 张雪莲;分散液液微萃取在果汁中农药残留检测中的应用研究[D];西南大学;2013年
6 傅深娜;基于卟啉的农药残留检测方法研究[D];重庆大学;2010年
7 玉晓微;苄嘧磺隆单克隆抗体的制备及应用初探[D];华中师范大学;2011年
8 杨欣;基于丝网印刷电极的电化学生物传感器及其在兽药和农药残留检测中的应用[D];宁波大学;2010年
9 沈旭;黄芪、白土茯苓和白芍药材农药残留测定方法研究[D];沈阳药科大学;2009年
10 陆庆;纳米硅胶表面分子印记聚合物的制备及其在毒死蜱农药残留检测中的应用[D];南京医科大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 胡续发;琼海实现瓜菜农药残留检测全覆盖[N];海南日报;2011年
2 记者 薄小波;蔬菜农药残留检测全覆盖[N];文汇报;2011年
3 通讯员 袁琳 贺亮军 本报记者 钱正云;强化蔬菜农药残留检测 确保食品安全[N];中国食品报;2011年
4 赵承 陈照;我国强化农药残留检测[N];中国农机化报;2000年
5 记者王振华;南农大推出农药残留检测新技术[N];中国化工报;2002年
6 记者 张小军;农药残留检测再出新技术[N];农资导报;2004年
7 吴永亮 周斌;农产品批发市场今后要变样[N];经济日报;2000年
8 本报记者 尼玛潘多;“绿色”蔬菜不遥远[N];西藏日报;2004年
9 ;虫眼儿多的蔬菜您别买[N];重庆日报;2005年
10 谢丽华;南江县积极开展农药残留检测工作[N];巴中日报;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978