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药用植物八角莲和六角莲的组培—栽培及鬼臼毒素含量分析

沈瑛瑛  
【摘要】: 八角莲(Dysosma versipellis)和六角莲(Dysosma pleiantha)都是小檗科八角莲属(Dysosma Woods.)的多年生草本植物,为民间传统治疗毒蛇咬伤、风湿等的中草药。近年来,又发现其含有的鬼臼毒素等成分具有抗肿瘤的效果,以鬼臼毒素为前体合成的一些抗癌药物已经开发成功并临床应用。然而,由于滥采乱挖八角莲已经濒临灭绝,现被列入国家濒危植物名录。本文通过对八角莲和六角莲不同野生居群进行了野外调查,对其组培快繁和移栽(包括组培苗和野生苗)进行了研究,并利用HPLC对不同野生居群八角莲和六角莲及八角莲组培品中鬼臼毒素含量等进行了测定,为八角莲的保护和资源开发利用奠定了一定的基础,研究结果如下: 在野外调查和八角莲移栽试验中发现,八角莲从原产地移栽到试验地大棚后,其物候发生了一定的变化,开花和结实等都提前,有些植株休眠期消失。各个不同地方的八角莲花、果实的形态各异,有些差异可以作为区别不同八角莲的依据。在组培苗移栽试验中发现环境的光强对于八角莲的生长有直接影响,光线太强容易使八角莲被灼伤而提前倒苗。在郁闭度为0.7的树林下八角莲生长良好;而在阳光直射的地方八角莲在春末夏初就开始出现被阳光灼伤的迹象,随之植株提前倒苗。 以八角莲和六角莲的胚为外植体进行离体培养,发现在合适的培养基上胚可以长出子叶和根,适合的培养基有MS+IBA0.5+BA1.0+GA_34.0(诱导子叶和根)、MS+BA1.0 mg/L+TDZ2 mg/L和MS+BA0.2mg/L+NAA0.5mg/L(诱导胚愈伤化),MS+BA0.2mg/L+NAA0.5mg/L和MS+IBA0.5 mg/L+BA1.0 mg/L+GA_34 mg/L组合对于金佛山八角莲胚丛芽和根的诱导效果较好。以六角莲的芽为外植体,在含有一定激素的培养基上可以诱导芽长成完整植株。 在鬼臼毒素含量分析中,我们得出了以下几点结论:1)不同居群的八角莲鬼臼毒素含量差异显著,中国东部、中部和西部的八角莲鬼臼毒素含量差异显著,与分子标记分析得出的八角莲地理谱系分化相似,其中中部的八角莲鬼臼毒素含量最高(达1.54%),西部峨眉山群体为最低(0.35%);2)八角莲在花果期鬼臼毒素含量较高,在7月份达到最高(1.02%);3)六角莲中鬼臼毒素含量(不到0.2%),不适合开发。 4)来自峨眉山的组培苗移栽不同年限后积累的鬼臼毒素不同,移栽第二年即可达到0.58%,高于野生植株近2倍,这说明仿生栽培可提高含量,建议2-3年生的组培苗植株可入药。


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