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灰树花β-葡聚糖的高效提取及量化技术

胡君荣  
【摘要】: 本文通过对灰树花β-葡聚糖的提取、测定、纯化和结构的研究,建立了荧光法测定1,3-β-葡聚糖的方法,并探讨了其测定影响因素;确定了灰树花β-葡聚糖高效提取的条件;分析了一种灰树花β-葡聚糖的结构。 1.研究表明可得然1,3-β-葡聚糖、酵母1,3/1,6-β-葡聚糖及灰树花中1,3-链葡聚糖与苯胺蓝的结合具有特异性;当以酵母1,3/1,6-β-葡聚糖为标准物时蛋白浓度在葡聚糖浓度的一半以下,蛋白对测定影响不大;当以可得然凝胶为标准物测量时,蛋白对测定影响不大,淀粉,纤维素和麦芽糊精添加会导致两种测定的荧光强度下降。 2.食用菌1,3-β-葡聚糖荧光法测定与鲎试剂法测定比较,结果表明荧光法简单可行。 3.通过响应面优化,得到灰树花多糖提取最佳条件为:提取功率137.6W;超声时间为16.9 min;酶解温度40℃,时间45 min,pH 6.0,加酶量1.5%;95℃提取两次,在此条件下,10 g灰树花多糖提取得理论值达到12.75%;灰树花β-葡聚糖提取最佳条件为:提取频率为148.3 W;时间15.6 min;温度为95℃,在此条件下,10 g灰树花多糖提取得理论值达到3.60%。 4.对热水提取粗β-葡聚糖进行离子交换层析、凝胶柱层析,纯化得到一种均一多糖GFWD,通过对其进行单糖组分分析,红外光谱分析及核磁共振分析,确定此多糖是一种1,3-β-葡聚糖。 本研究创新点在于: 1.建立了荧光法测定1,3-β-葡聚糖的方法,并研究了其影响因素。 2.以响应面法优化了灰树花β-葡聚糖的超声-酶法提取工艺。 3.测定了灰树花热水提、冷碱提取和热碱提取粗多糖中β-葡聚糖和1,3-β-葡聚糖的含量。 4.通过气相色谱、红外光谱和核磁共振解析了一种热水提取β-葡聚糖的结构。


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