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几种植物病毒侵染寄主的组织病理学和诊断研究

郑瑛  
【摘要】: 植物病毒病是导致植物病害的重要原因。为了真确认识并有效防控植物病毒病的发生,人们采用了多种技术方法来研究植物病毒对植物的影响。最常见的有生物学技术、血清学技术、显微镜技术和分子生物学技术。本文主要采用了电子透射显微镜技术和生物学技术对植物病毒进行了实验研究。 本文采用常规化学方法和超低温快速冷冻两种超薄切片样品制备方法,通过透射电子显微镜来观察超薄切片中寄主细胞的超微结构,并进行详细比较。观察到超低温快速冷冻方法制备的植物细胞内叶绿体、线粒体等大细胞器结构更加饱满,近似于圆球体;细胞中其他细胞器例如高尔基体等,在化学处理的超薄切片中较难观察到,而在超低温快速冷冻方法处理的超薄切片中很容易看到;超低温快速冷冻方法处理的植物细胞中的泡状结构含有丰富的内容物;植物细胞的膜结构在超低温快速冷冻方法处理的超薄切片中更加清晰可辨,同时常规化学方法处理的植物样品经常发生的质壁分离现象在超低温快速冷冻方法处理中却很少看到。但是病毒粒子和内含体的形态分布在两种方法处理的样品中无明显差异。超低温快速冷冻方法有利于正确辨别植物病毒所引起的寄主细胞病理变化,避免化学制样处理而产生的人工假象。 黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)作为典型的+ssRNA病毒,基因组结构相对简单,是研究RNA病毒在寄主上致病机制的模式病毒之一。本文以普通烟为主要寄主材料,接种六种CMV重组突变体,用于研究比较CMV各基因片段在其侵染寄主过程中所起的作用。在实验中,观察到不同RNAs组合的CMV侵染普通烟时,病毒对普通烟的危害程度由低到高分别为:CMV-FnyΔ2bCMV-FRad35~(2b)CMV-Fny-satYn12 CMV-Fny-satT1CMV-FNa~(2b)CMV-Fny。受缺失2b基因的CMV-FnyΔ2b侵染的普通烟在病毒侵染后期,生长状况优于对照组。CMV-FnyΔ2b,CMV-FRad35~(2b)两种病毒在普通烟中的增殖量远远低于其他4种病毒。


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