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半边莲对BGF诱导的HaCaT细胞增殖与凋亡的影响

陈琼  
【摘要】:半边莲对EGF诱导的HaCaT细胞增殖与凋亡的影响目的:研究半边莲对EGF诱导的HaCaT细胞增殖与凋亡的影响,观察半边莲对HaCaT细胞表达cyclinD1、Bcl-2的影响,探讨半边莲治疗银屑病可能的作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测不同浓度EGF对HaCaT细胞增殖的影响及不同浓度半边莲对EGF诱导的HaCaT细胞增殖的影响;流式细胞仪采用FITC-AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡率;免疫印迹法检测细胞内cyclin D1、Bcl-2蛋白的表达情况。结果:(1)5ng/ml的EGF可明显促进HaCaT细胞增殖(P0.05),10ng/ml的EGF基本达到最大效应(P0.01);在20ng/ml至120ng/ml,其增殖能力与10ng/ml比没有统计学意义(P0.05)。(2)半边莲在5mg/ml-60mg/ml浓度范围内均能抑制HaCaT细胞增殖(P0.01),抑制作用随着浓度增加而增强。(3)半边莲浓度为10mg/ml,20mg/ml,30mg/ml时均能诱导细胞出现凋亡,且随着药物浓度的增加细胞凋亡率增加,在20mg/ml浓度时诱导细胞凋亡作用最佳。(4)免疫印迹法检测结果显示,半边莲浓度为 5mg/ml,10mg/ml,20mg/ml 时 cyclin D1、Bcl-2 的表达逐渐降低。结论:半边莲可抑制EGF诱导的HaCaT细胞增殖,并可促进其凋亡。推测半边莲可能通过下调促增殖基因cyclin D1及抗凋亡基因Bcl-2从而发挥抑制角质形成细胞增殖及促进其凋亡的作用。


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