收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

基于NLRP3炎性体和TLRs/MyD88/NF-κB信号转导通路探讨加味三妙丸防治痛风性关节炎的机制

邢梦雨  
【摘要】:目的研究加味三妙丸(MSMP)对NLRP3炎性体和TLRs/MyD88/NF-κB信号转导通路中关键基因的调控作用,探讨其抗痛风性关节炎的机制。方法流式细胞仪检测不同分化时间对细胞表面标志物CD11b、CD14表达的影响,明确THP-1细胞分化条件;MTT法测定造模、给药及造模给药对细胞存活率的影响;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养基中炎症因子IL-1β分泌水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NLRP3炎性体和TLRs/MyD88/NF-κB炎症信号转导通路中相关蛋白表达情况。将90只C57BL/6雄性小鼠随机分组,正常组、模型组、秋水仙碱组(1mg/kg),MSMP低、中、高剂量组(100、300、500 mg/kg),给药组分别给予相应药物,正常组与模型组给予等量蒸馏水灌胃,灌胃第6天造模,给药组注射MSU混悬液至小鼠踝关节制备小鼠急性痛风性关节炎模型,正常组注射等量生理盐水;于注射后2 h、4h、6h、10h、24 h测定小鼠踝关节肿胀度;ELISA检测不同组中小鼠踝关节组织炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的水平;HE染色切片观察小鼠踝关节炎性浸润情况;Western blot测定踝关节组织中NLRP3和TLRs/MyD88/NF-κB炎症信号转导通路中相关蛋白表达情况。结果1.通过流式细胞术确定了THP-1细胞的分化方法为50 ng/mL PMA处理24 h;通过MTT法确定造模给药时间为24 h,秋水仙碱实验浓度为0.1μM,MSMP低、中、高组实验浓度分别为0.1、0.2、0.4 mg/mL;MSU刺激LPS引发的THP-1细胞痛风模型,能提高炎症因子IL-1β分泌水平,而MSMP能够降低炎症因子IL-1β分泌水平,且作用呈剂量依赖性,其中高剂量组(MSMP 0.4 mg/mL)效果最好,几乎与秋水仙碱作用相当,说明MSMP对细胞具有一定保护和抗炎作用。2.MSU刺激能够激活LPS引发的THP-1细胞中NLRP3炎性体和TLRs/MyD88/NF-κB炎症信号转导通路,致使NLRP3、ASC、Caspase-1、P-NF-κB、P-IκBα、P-IKKα及MyD88、TLR2、TLR4蛋白表达上升。而MSMP能调控NLRP3炎性体和TLRs/MyD88/NF-κB炎症信号转导通路相关蛋白表达,从而减少炎症因子IL-1β分泌,进而减轻痛风炎症,效果具有剂量依赖性。3.动物实验中模型组结果表明,注射一定量的MSU混悬液至小鼠踝关节腔以建立急性痛风性关节炎模型的方法切实可行;MSMP不仅能降低急性痛风性关节炎小鼠踝关节肿胀度,减轻炎性浸润,还能够降低小鼠踝关节组织中炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α分泌水平,并且随着剂量升高,炎症因子逐渐减少,效果具有剂量依赖性;MSMP能调控NLRP3炎性体和TLRs/MyD88/NF-κB炎症信号转导通路相关蛋白表达,从而减少炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α分泌,进而降低炎症,缓解痛风,高剂量效果最为明显。结论THP-1细胞经50 ng/mL PMA处理24 h即可成功分化;MSMP能降低THP-1细胞痛风模型中炎症因子IL-1β分泌;降低急性痛风性关节炎小鼠踝关节肿胀度,减轻组织炎性浸润,降低炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α分泌水平;其作用可能通过调控NLRP3炎性体和TLRs/MyD88/NF-κB炎症信号转导通路的活化来实现;高剂量组与秋水仙碱效果相近。MSMP可能通过上述通路发挥抗炎作用,从而对细胞和组织起到保护和治疗作用。该研究结果为痛风的发病机制及治疗奠定了基础。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前15条
1 孙勇;张相彤;梁洪生;;NLRP3炎性体在脑出血中的研究进展[J];国际神经病学神经外科学杂志;2017年01期
2 曾俊莉;吴冠楠;宋勇;;线粒体相关的NLRP3炎性体激活[J];中华肺部疾病杂志(电子版);2015年03期
3 贺琼;桂庆军;;NLRP3炎性体与冠心病的相关性研究进展[J];现代医药卫生;2013年17期
4 徐玲玲;杨俊伟;;NLRP3炎性体与肾脏疾病[J];肾脏病与透析肾移植杂志;2011年06期
5 党万太;周京国;谢文光;蔡燕;郭晓兰;赵明才;邱亚;;NLRP3炎性体在痛风性关节炎患者炎症反应中的机制研究[J];中国免疫学杂志;2014年03期
6 臧红;沈宏辉;辛绍杰;;炎性体NLRP3及其在肝损伤中的作用[J];肝脏;2016年02期
7 冉艳;陈建忠;;NLRP3炎性体与2型糖尿病研究进展[J];细胞与分子免疫学杂志;2013年12期
8 丁焕发;徐晓辰;王尚云;刘淑娟;兰立强;韦涌涛;;急性痛风性关节炎患者治疗前后外周血单核细胞NLRP3炎性体mRNA表达及血清IL-18水平的研究[J];中国医药指南;2016年14期
9 丁焕发;韦涌涛;刘淑娟;徐晓辰;兰立强;王尚云;;急性痛风性关节炎患者治疗前后外周血单核细胞NLRP3炎性体mRNA表达及血清IL-6水平的研究[J];中外医疗;2016年23期
10 李丹;高珊;;NLRP3炎性体在心肌缺血再灌注损伤中作用的研究进展[J];天津医药;2021年06期
11 张凤云;崔金金;张慧;吕勃;于波;;NLRP3炎性体与中性粒细胞在心肌缺血/再灌注损伤中的交流[J];现代生物医学进展;2015年15期
12 杨春敏;孙经武;;NLRP3炎性体与心血管疾病关系的研究进展[J];心肺血管病杂志;2015年12期
13 苏毕·阿吉;尹洪超;;可溶性高尿酸对人脐静脉内皮细胞NLRP3炎性体途径的影响[J];医学研究杂志;2020年01期
14 宋先东;李扬;刘波;闫昭威;孙继平;朱敏;;NLRP3炎性体信号通路在急性痛风性关节炎患者中的变化研究[J];中国现代医生;2017年17期
15 洪宝建;苏丽韫;梁丽娟;朱月霞;徐芳;陈建忠;;NLRP3炎性体相关分子表达与老年2型糖尿病的关系[J];浙江医学;2016年20期
中国重要会议论文全文数据库 前20条
1 陈宇奕;杨秋冬;孙雯;袁华;;NLRP3炎性体介导牙周炎的作用机制研究[A];2019第九次全国口腔生物医学学术年会论文汇编[C];2019年
2 王德光;丁丽红;;白蛋白导致肾小管上皮细胞NLRP3炎性体激活的机制分析[A];中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2018年学术年会论文摘要汇编[C];2018年
3 李艳蝶;卢美萍;;NLRP3炎症小体在全身型幼年特发性关节炎发病机制中的研究[A];2018年浙江省医学会儿科学分会学术年会论文汇编[C];2018年
4 王瑸玢;朱杰;李丹丹;汪洋;詹媛;谭磊;仇旭升;孙英杰;宋翠萍;孟春春;廖瑛;茅翔;孟广勋;丁铲;;新城疫病毒感染能诱导NLRP3炎症小体的激活[A];第八届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2016年
5 王娜娜;陈莉丽;谭静怡;连璐雅;丁佩惠;;NLRP3炎性小体通路在牙周炎中作用的探究[A];第十一次全国牙周病学学术会议摘要汇编[C];2017年
6 谭红梅;;同型半胱氨酸激活NLRP3炎症小体促进动脉粥样硬化的作用研究[A];第十四届中国实验动物科学年会论文集[C];2018年
7 毛志娟;韩海燕;季苏琼;杨清梅;叶鸿翔;薛峥;;NLRP3在帕金森病发病机制中的作用[A];中华医学峰会暨中华医学会神经病学分会第八届全国中青年神经病学学术会议论文汇编[C];2015年
8 毛志娟;韩海燕;季苏琼;杨清梅;叶鸿翔;薛峥;;NLRP3在帕金森病发病机制中的作用[A];中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编(下)[C];2015年
9 王振磊;孙萍萍;李天晓;黎曙霞;;白头翁汤激活NLRP3炎症小体治疗炎症性肠病的研究[A];2013年广东省药师周大会论文集[C];2013年
10 谭梦珊;郁金泰;谭兰;;NLRP3炎症小体与阿尔茨海默病关系的研究进展[A];山东省2013年神经内科学学术会议暨中国神经免疫大会2013论文汇编[C];2013年
11 李洒丽;姚文旭;徐磊;武慧芳;刘宇;叶纯;邱银生;;黄芩苷对脂多糖诱导后仔猪外周血单核细胞NLRP3信号通路的影响[A];中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会论文集[C];2015年
12 张正民;张翔;杨秀梅;;体育在青少年性度形成与性体像重塑中的应用研究[A];第九届全国运动心理学学术会议论文集[C];2010年
13 钟琳晔;杨汀;;NLRP3炎症小体及其激活产物在慢性阻塞性肺疾病中的作用研究进展[A];中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编[C];2013年
14 张钰;韩琛;王恒孝;;NLRP3炎性小体与酒精性脂肪性肝炎研究进展[A];第十四次中国中西医结合实验医学学术研讨会论文汇编[C];2017年
15 冯宁宁;崔丽娟;;城市环境质量对居民地方依恋的预测:恢复性体验的中介作用[A];第十八届全国心理学学术会议摘要集——心理学与社会发展[C];2015年
16 吴剑波;于金贵;胡国昌;;NLRP3炎性体对机械通气肺损伤的调节作用[A];山东省第十六次麻醉学学术会议论文汇编[C];2013年
17 胡金莲;马秀娟;杜秀明;宗英;张子腾;陈基快;陆国才;;NLRP3炎症小体对心肌细胞体外增殖能力的影响[A];2016年第六届全国药物毒理学年会论文集[C];2016年
18 魏清;牟坤;李涛;张颖;贾晓青;韩丽辉;;NALP3炎性体表达下调促进肝细胞肝癌进展[A];第八届全国免疫学学术大会论文集[C];2012年
19 冉文卓;周勇;刘田;刘永平;梅文秀;李萍;管茶香;;血管活性肠肽下调双刺激下巨噬细胞NLRP3炎症小体的启动和活化[A];中国生理学会第24届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文汇编[C];2014年
20 张杰;周力;刘苓;;免疫组化检测NLRP3炎症复合体在诊断肠结核、炎症性肠疾病中的价值探讨[A];第十七届西南地区消化病学术会议暨2014贵州省消化病及消化内镜学术年会论文汇编[C];2014年
中国博士学位论文全文数据库 前20条
1 吴剑波;NLRP3炎性体对机械通气所致肺损伤的调节作用[D];山东大学;2014年
2 吴冠楠;细胞外线粒体DNA促进NLRP3炎性体活化、介导急性肺损伤的研究[D];南京大学;2015年
3 李夏;P2X7受体基于NLRP3炎性小体调控酒精性脂肪性肝炎的机制研究[D];延边大学;2019年
4 黄小勇;VSIG4负向调节NLRP3炎症小体活化[D];中国人民解放军陆军军医大学;2019年
5 张子腾;NLRP3炎症小体在小鼠疲劳样行为中的作用及机制研究[D];中国人民解放军海军军医大学;2018年
6 王丽娜;粪肠球菌及其LTA对NLRP3炎性体的活化作用及药物干预研究[D];大连医科大学;2016年
7 阴海鹏;多酚类化合物通过抑制NLRP3炎症小体发挥抗炎作用的研究[D];山东大学;2018年
8 边晔;吸烟对大鼠NLRP3炎症小体信号通路的影响[D];北京协和医学院;2018年
9 卢亚奇;NLRP3炎症小体活化在日本血吸虫感染引起的肝纤维化中的作用及机制研究[D];华中科技大学;2018年
10 闻毅;NLRP3炎性小体活化在急性与慢性肾损伤中作用及机制的研究[D];东南大学;2018年
11 陈羽;NLRP3炎症小体在非酒精性脂肪性肝炎的相关机制研究[D];南方医科大学;2019年
12 苏文君;NLRP3炎性小体在抑郁症与糖尿病共病中的作用及其机制研究[D];中国人民解放军海军军医大学;2019年
13 郎悦;NLRP3炎性小体在实验性自身免疫性脑脊髓炎/实验性自身免疫性神经炎发病中的作用及相关机制探究[D];吉林大学;2019年
14 刘秋平;非诺贝特通过活化Nrf2信号通路并抑制NLRP3炎症小体激活在糖尿病视网膜病变中的作用[D];南昌大学;2018年
15 何鸿宾;冬凌草甲素抑制NLRP3炎症小体并缓解相关疾病的作用及机制探究[D];中国科学技术大学;2018年
16 刘双格;雌激素介导NLRP3炎性体参与子宫内膜癌发生发展的分子机制[D];华中科技大学;2017年
17 宗英;LTα-55对核辐射骨髓损伤的保护作用及基于NLRP3炎症小体的机制研究[D];第二军医大学;2017年
18 刘海亮;抑制NLRP3炎性体联合CIK细胞治疗胰腺癌的实验研究[D];中国人民解放军医学院;2016年
19 MUHAMMAD ISHFAQ;黄芩苷通过调控NLRP3-自噬通路和能量代谢干预鸡毒支原体诱导的炎症反应机制[D];东北农业大学;2021年
20 付岳;白藜芦醇抑制辐射诱导的NLRP3炎症蛋白复合体激活的机理研究[D];北京协和医学院;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前20条
1 邢梦雨;基于NLRP3炎性体和TLRs/MyD88/NF-κB信号转导通路探讨加味三妙丸防治痛风性关节炎的机制[D];浙江中医药大学;2019年
2 谢海龙;2型糖尿病患者外周血单个核细胞NLRP3炎性体mRNA表达和炎性因子水平与动脉粥样硬化相关性研究[D];长江大学;2015年
3 周敏;单增李斯特菌诱导滋养细胞NLRP3炎性体活化[D];吉林大学;2015年
4 李富凤;补中益气汤对溃疡性结肠炎肠道NLRP3炎性体活性的调控研究[D];广州中医药大学;2015年
5 杨其彬;NLRP3炎性体信号通路在急性痛风性关节炎患者中变化的研究[D];川北医学院;2011年
6 马映雪;蓝光诱导人视网膜色素上皮细胞分泌的外泌体与NLRP3炎性体的相关性研究[D];天津医科大学;2016年
7 徐晓艳;TIM-4与2型糖尿病的相关性及对NLRP3炎性体的抑制效应[D];山东大学;2015年
8 胡啸竹;肝X受体激动剂抑制NLRP3和NLRC4炎性体的活化[D];吉林大学;2014年
9 杨加伟;糖皮质激素调控NLRP3炎性体表达在ALI/ARDS中的作用和机制[D];苏州大学;2016年
10 于成成;NLRP3、NLRP1炎性体信号通路在系统性红斑狼疮、类风湿关节炎免疫机制中的作用[D];山东大学;2013年
11 余珊;脂肪组织Nlrp3炎性体改变在追赶生长胰岛素抵抗形成中的作用[D];华中科技大学;2013年
12 赵照阳;TRPV4通道介导NLRP3炎性体活化促进小鼠无菌性心包炎后心房颤动发作[D];华中科技大学;2020年
13 王和暄;氯沙坦对NLRP3炎性体的调节及其在脓毒症肺损伤中的作用[D];上海交通大学;2019年
14 刘念;NLRP3炎性体参与胰岛素引起的大鼠血管平滑肌细胞炎症发生[D];第三军医大学;2014年
15 魏清;胞外ATP和NLRP3炎性体对肝细胞肝癌的作用效应[D];山东大学;2013年
16 倪海燕;血尿酸激活NLRP3炎性体参与冠脉局部炎症反应的研究[D];川北医学院;2014年
17 王蓉;HBV通过激活NLRP3炎性体促进IL-1β产生的作用及机制研究[D];山东大学;2013年
18 黄星;NLRP3炎性小体复合物的组装在CVA16感染所致炎症中的作用分析[D];北京协和医学院;2019年
19 陈小敏;NLRP3炎症小体在银屑病合并代谢综合征中的作用及相关性分析[D];新疆医科大学;2021年
20 丁小林;HBV C区基因对NLRP3炎症小体信号通路调控机制的研究[D];重庆医科大学;2019年
中国重要报纸全文数据库 前5条
1 记者 钱铮;家庭不和睦易“降低”青少年初次性体验年龄[N];新华每日电讯;2008年
2 张巍巍;蛋白质异性体与癌症无关的理论被推翻[N];科技日报;2008年
3 中国妇女报记者 项丹平;女性体寒容易招惹癌 “三字经”助你驱寒祛湿[N];中国妇女报;2015年
4 杜燕华;埃克森美孚开发出新型热塑性强性体产品[N];中国包装报;2006年
5 本报记者 巨侃;把宝鸡打造为区域性体运中心[N];宝鸡日报;2020年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978