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松树根特异表达启动子的功能研究及其在水稻中调节Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的表达

陈观平  
【摘要】: 植物中PR10蛋白( pathogenesis-related protein, PR )的表达受渗透胁迫、低温、创伤和病原体侵染等因素的诱导,这表明它们在植物防御反应中起着重要作用。 本文对已克隆的PR10基因启动子序列(PmPgPR10和PmPsPR10 )的功能进行了研究,并利用5’-deletion技术筛选其最短必需序列。我们还构建了PmPgPR10 (PmPsPR10)与TaNHX2的植物表达载体,导入农杆菌后进行水稻遗传转化,共获得了47株转基因水稻植株,并对转基因植株进行了PCR和Southern检测。 主要结果如下: 1、通过构建启动子不同长度序列::GUS融合表达载体并转化烟草,获得了大量的转基因植株; 2、筛选得到一个800bp的启动子最短必需序列,在低温和盐胁迫下,该启动子能调节GUS在烟草根部特异性表达; 3、转TaNHX2基因水稻的PCR检测结果表明: 62%的潮霉素抗性水稻能扩增出1.6kb的特异性条带,未转基因对照植株没有明显信号; 4、转TaNHX2基因水稻的Southern结果表明:17株转基因水稻有强阳性信号,未转基因对照植株没有杂交信号,表明TaNHX2已整合进水稻基因组中。


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